凝聚胺法交叉配血的干扰及排除方法

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1、凝聚胺法交叉配血的干扰及排除方法1材料与方法1.1试剂BASO-Polybrene试剂(低离子溶液LIM，凝聚胺溶液Polybrenereaget，悬浮液resuspending)为(台资)珠海贝索生物技术有限公司生产。1.2材料我院2008年5月～2010年5月住院受血者血样共26例，其1材料与方法1.1试剂BASO-Polybrene试剂(低离子溶液LIM，凝聚胺溶液Polybrenereaget，悬浮液resuspending)为(台资)珠海贝索生物技术有限公司生产。1.2材料我院2008年5月～2010年5月

2、住院受血者血样共26例，其中外伤患者11例，消化道出血患者12例，肾病透析患者3例。1.3交叉配血方法在主侧管内加受血者血清2滴和献血员3％洗涤红细胞悬液1滴；次侧管加入献血员血清2滴和受血者3%洗涤红细胞悬液1滴。各管加入LIM低离子溶液0.7ml，混匀，再各管加入凝聚胺溶液2滴，混匀，3400转/分离心10秒，弃去上清液，让管底残留约0.1ml液体，轻摇试管并观察管底红细胞是否凝集(若不凝需重新操作查找原因)。最后各管加入悬浮液2滴，轻轻摇动试管混合并观察结果。若凝集在1分钟内散开，代表是由Polybrene引起

3、的非特异性聚集，配血结果相合；若凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如结果可疑，可倒在玻片上用显微镜观察。2结果12例消化道出血患者进行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，有7例未能引出红细胞非免疫性的可逆聚合。3例肾病透析患者进行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，均未能引出红细胞非免疫性的可逆聚合，当所凝聚胺试剂量加到6滴时，出现红细胞凝集。11例外伤患者进行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，能引出红细胞非免疫性的可逆聚合，但在显微镜下出现串钱状凝集。3讨论1980年Palez

4、ari和Jiang首先将凝聚胺技术应用在血库作业上，随后Fisher于1983年对盐水介质法、木瓜酶法、低离子盐水法和凝聚胺法等4种方法检测异体抗体的能力进行比较，结果发现凝聚胺法灵敏度高出其他方法2～250倍，而且具有方法简便、时间短、灵敏度高、结果明显等优点[1]。笔者在2年的实验室配血中发现，凝聚胺交叉试验中虽然存在如冷凝集、纤维蛋白等干扰，但这些问题都易于解决。但临床上一些药物的使用会使交叉配血出现一些异常结果。运用凝聚胺技术进行交叉配血，是利用低离子介质减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞与血清或血浆中抗

5、体结合。凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解产生的正电荷能中和红细胞膜表面带有负电荷的唾液酸，使红细胞的Zete电位降低，红细胞之间距离缩短，使红细胞发生非特异性凝集，此凝集是可逆的[2]。当再加入悬浮液，悬浮液主要是枸橼酸钠，枸橼酸根离子的负电荷能与凝聚胺上的正电荷中和，使非免疫性的可逆聚合现象消失，结果为阴性，而真正的凝集无法散开为阳性结果。在对消化道出血患者进行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，有7例不出现红细胞非免疫性的可逆聚合，即使再多加入凝聚胺试剂也不能排除干扰。这是因为止血敏药物在水溶液中带有负

6、电荷，能使红细胞膜表面的Zete电位上升，增加红细胞之间的排斥力。经过了解12例消化道出血患者在治疗过程当中均使用了止血敏药物。实验观察到只有等止血敏的半衰期后方可消除其干扰作用。实际工作中滴注止血敏2d～3d后重新抽取患者血样本，止血敏的干扰得以完全消除。肝素有干扰作用。肾病患者在进行血液透析时均要使用肝素，因此在对肾病透析患者进行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，均不能引出红细胞非免疫性的可逆聚合。但是当多加几滴凝聚胺试剂以中和肝素后，即可恢复红细胞非免疫性的可逆聚合，达到消除干扰的目的。在对11例外伤患者进

7、行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，均能引出红细胞非免疫性的可逆聚合，但再加入悬浮液后，显微镜下出现串钱状凝集，查阅病历得知这些患者均在抢救过程中输入了6％低分子右旋糖酐注射液，将患者血清用生理盐水作适当稀释(1∶1)后，再进行交叉配血实验，此种凝集现象即会消失。这种串钱状凝集的出现往往容易与真凝集相混淆，但串钱状凝集并不是真正的凝集。本文对11例患者均输入同型新鲜血液，无1例发生输血反应，因此在交叉配血实验中，对真凝集与串钱状假凝集现象一定要严格区分，特别注意了解分析病史，才能保证实验结果的真实性。从以上观察与

8、实验结果表明，当交叉配血进行过程中，若遇到某种干扰情况时，一定要结合病史仔细分析临床治疗情况，方能及时准确地排除干扰因素，确保输血安全。本篇文章来源于检验在线http://www.labbbs.com/原文链接：http://www.labbbs.com/article/experience/0NMDAwMDAwMzg0NA.html