GBT 18645-2002 动物结核病诊断技术

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1、GB/'r18645-2002前台本标准主要是根据世界动物卫生组织[WorldOrganizationfo:八nimalHealth英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE]1996年颁布的《诊断试验和疫苗标准手册》(Manualofstandardsfordi-agnostictests&.vaccines)中3.2.3,3.2.3.6的牛结核病和3.6.8的禽结核病部分的内容制定的。考虑到我国的实际情况，对其中一些在我国还无法进行的检验技术作了删减(如:淋巴细胞增生试验;Y一干扰素试验)这样，一方面通过

2、与国际同类要求尽可能一致，以使我国适应国际贸易、技术和经济交流。另一方面，又考虑到我国的实际情况，使得技术方法具有可行性。本标准中的生物制品应符合中华人民共和国《兽用生物制品质量标准))(1992)的要求。本标准的附录A、附录B、附录C都是标准的附录，附录D是提示的附录本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位:中国兽医药品监察所。本标准卞要韶草人:毛开荣、陈向经、关孚时、罗玉峰。中华人民共和国国家标准动物结核病诊断技术Gs/T186452002Diagnostictechniquesfortub

3、erculosisofanimal范围木标准规定厂动物结核病的检测方法和要求本标准适用于动物结核病检测。2定义、符号和缩略语本标准采用卜列钧号和缩略语:P(,I);提纯蛋1}衍生物(purifiedproteinderivative)oIll:IA际iyi位(internationalunit)3细菌学检查3.1li%i料的采集和处理川于细菌学检查的材料采自淋巴结及其他组织。当活畜有可疑的呼吸道结核、乳房结核、泌尿生殖道结核、肠结核时，其痰、乳、精液、子宫分泌物、尿和粪便可作为细菌学检查的材料对那此结核分枝杆菌PPU皮内变态反应试验阳性，但尸检

4、时无病理学病变的动物，可从下领.uN后、支产毛4q:、肺(特别是肺门及肺门淋巴结)、纵隔及一些肠系膜的淋巴结采集样品送检样品应封装在无菌的容器内冷藏运送，为f提高检出结果，样品[if采取消化浓缩法处理，处理方法见附录A(标准的附录)3.1.1痰对牛常可川痰进行细菌学检验。牛咯痰极少，宜在清晨采集用硬橡胶管自口腔伸人至气管内，外端连接注射器吸取痰液。亦可取牛咳出的痰块进行检验。痰样品稀薄时，可加人等量的4%-6%硫酸(见附录A中Al)处理，如痰样品粘稠时，则加人5倍星的1%硫酸处理。充分摇匀后置37C、作用20min，以3000r/mind000

5、r/min离心，沉淀物作染色镜检、培养和动物试验也dl用2倍量15in-20%安替福民(antiformin)溶液(见附录A中A3)处理痰液，将混合物置37C作用11-2h后离心以灭菌生理盐水冲洗沉淀物几次后，取沉淀物染色镜检、培养和动物试验11.2乳怀疑有乳房结核时、可无菌采集乳汁进行检验(、一般以挤出之最后乳汁含菌量较多，旱晨挤出的乳'j,含菌量最高)=将乳汁分置4--6支离心管中，每管10nil-，以3000r/min-4000r/min离心20mm、一30min,吸取曰公乳脂和管底的沉淀物作染色镜检、培养和动物试验乳汁]10ml.加酒精

6、和乙醚各10m工及15%-2000安替福民溶液30ml,摇匀置37Y恒温箱内1h一2h,取出加等量灭菌蒸馏水混匀离心沉淀后弃去卜清，取沉淀物作染色镜检、培养和动物试验31.3精液和子宫分泌物中华人民共和国国家质最监督检验检疫总局2002一02-19批准200205一01实施cB/T18645--2002有生殖道结核可疑时，可采集公畜精液、母畜子宫分泌物进行细菌学检杳处理子宫分泌物，可用15%一20%安替福民溶液，混匀后静置2h^-3h,3000r/mir、一4000r/min离心20min，弃上清，加lom工蒸馏水于沉淀物中。即可作动物试验，经

7、1.5一2个月剖检3门.4尿有肾结核可疑时，可采集尿液，一般采集中段尿液，以早晨第一次尿为宜〕如仅作染色镜检，可将尿液以3000r/min-4000r/min离心20min后，取沉淀物涂片如作培养或动物试验，则应将尿液进行消化浓缩处理，再进行检验以免杂菌生长而影响检验结果3.1.5粪便有肠结核可疑时，可采集粪便进行细菌学检查，患肺结核的牛只，有时在粪便中亦可检出结核分枝杆菌。因牛常将痰液吞咽至消化道内，随粪便排出尽量采集混有粘液或脓血的粪便。取粪便30g，加15%20%安替福民溶液15m1一和蒸馏水55ML,混合，经2h--3h后，3000r/

8、min-4000r/min离心30min，倾去上清液，加10m工_蒸馏水于沉淀物中，将此液用纱布过滤后接种于豚鼠皮下，经1.5-2个月后剖检。或将粪便