资源描述：
《肠杆菌科细菌糖快速生化反应实验探讨.docx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、360【临床检验】中国卫生检验杂志2000年6月第10卷第3期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology20001Vol1101No131〔文章编号〕1004-8685(2000)03-0360-02肠杆菌科细菌糖快速生化反应实验探讨姜杭华吴振安(北京中西医结合医院检验科100039)〔中图分类号〕R44611〔文献标示码〕B肠杆菌科细菌快速生化反应已成为临床检验工作者急需研究解决的问题。近年来,已出现不少的肠杆菌科细菌快速生〔1～3〕化反应系统,这些快速生化反应系统一般都是增大菌液浓度(3～
2、9亿öml),需4h观察结果。本文研究在增大菌液浓度基础上,再适当增大底物浓度及改善实验条件,使反应速度进一步加快。现介绍如下:H培养基上置37℃孵育箱中过夜增菌后,挑取菌落以019%生理盐水配成浓菌液,使其与10号麦氏比浊管浊度一致。11312取缓冲指示液215份放入无菌试管中,加入20%基质液1份,浓菌液1份,放入37℃冰箱,分别于10min、30min、2h观察结果。结果判定呈黄色为阳性,呈红色为阴性,介于二者之间为可疑。11313挑取同一种菌落分别接种于葡萄糖、蔗糖、乳糖微量1材料与方法生化管,放置37℃孵育箱过夜,观察结果,
3、作为对照组。11标本30株肠杆菌科细菌,均来自本院临床标本,经细134统计学处理X2检验菌室常规方法鉴定。112试剂2结果11111121磷酸盐缓冲指示液K2HPO4004g,KH2PO4001g,2130株肠杆菌科细菌糖快速生化反应实验组与对照组结111108g,1%酚红液012ml,蒸馏水100ml。KCl0果见表1。1121220%基质液、葡萄糖、蔗糖、乳糖各20g分别溶于212表2-4分别为不同时间、不同基质液实验组与对照组蒸馏水中,经55116KPa15min灭菌备用(上述各种糖试100ml的X2检验。由表2可见:10min时
4、,肠杆菌科细菌对葡萄糖、剂均为北京化工厂产品)。蔗糖、乳糖的分解,实验组与对照组均存在显著性差异(P<123葡萄糖、蔗糖、乳糖微量生化管(中国人民解放军浙005)。由表3可见:30min时,肠杆菌科细菌对葡萄糖、蔗糖11ö1105),对乳糖江省军区后勤部卫生防疫检验所,批号9701)。的分解,实验组与对照组均无显著性差异(P>0112410号麦氏比浊管(相当于30亿ml的含菌量)。分解二组比较有显著性差异(P<005)。由表4可见:2h,肠13方法杆菌科细菌对乳糖分解实验组与对照组比较无显著性差异(P11131菌液制备将保存的肠杆菌科菌
5、种划线接种于M->0105)。表1肠杆菌科细菌糖快速生化反应实验组与对照组结果菌种名称菌株数蔗糖葡萄糖乳糖10min30min2h对照10min30min2h对照10min30min2h对照大肠埃希菌3++++++++++++肺炎克雷伯菌3----++++----产酸克雷伯菌3-+++++++----摩氏摩根菌1±+++±+++----奇异变形杆菌2++++±+++----普通变形杆菌2++++++++++++产气肠杆菌2++++++++---+阴沟肠杆菌2++++++++-±++聚团肠杆菌1++++±+++--±+山反崎肠杆菌1-++
6、+--++----粘质沙雷菌3++++±+++--++液化沙雷菌2±+++++++-±++深红沙雷菌1-+--±±++--±-弗劳地枸橼酸杆菌1-±++++++----1异型枸橼酸杆菌3++++++++±±++11注:+表示阳性,-表示阴性,±表示可疑。中国卫生检验杂志2000年6月第10卷第3期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology20001Vol1101No131361表210min时肠杆菌科细菌对三种糖分解结果比较对照组蔗糖组葡萄糖组乳糖组+-合计+-合计+-合计实+180182302
7、3303验±或-7512707141327组合计2553030030171330表330min时肠杆菌科细菌对三种糖分解结果比较对照组蔗糖组葡萄糖组乳糖组+-合计+-合计+-合计实+2512627027505验±或-134303121325组合计2643030030171330表42h肠杆菌科细菌对乳糖分解结果比较对照组+-合计实+15015验±或-21315组1713303讨论肠杆菌科细菌糖快速生化反应其原理为,将细菌接种到底物中后,由于菌量大,底物浓度大,在适宜的反应条件下,细菌本身产生的酶使底物指示系统发生快速反应。本实验所述的
8、适宜反应条件为:用水浴箱培养,使反应系统受热快而均匀;磷酸盐缓冲溶液有利酶促反应的进行;酚红液是一种敏感的指示剂(变色范围为pH617～814)。由表3及表4可知,肠杆菌科细菌对葡萄糖、蔗糖的分解分别只需3
