第2节_基因工程及其应用.ppt

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1、1、怎样理解基因工程的概念？2、基因工程最基本的工具有哪些？有什么作用？3、基因工程操作一般包括哪四个步骤？如何进行操作？自学提纲基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。也就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，定向地生物的遗传性状。基因工程是在DNA水平上进行设计施工。1、问：怎样理解基因工程的概念？提取修饰改造改造分子2．作用：定向改造生物的遗传性状3、原理：基因重组1．２０世纪９０年代，北京大学教授陈章良将固氮基因整合到小麦的ＤＮＡ分子中，并成功

2、表达。其培育固氮小麦的变异机理是（　）Ａ．基因重组　　　Ｂ．基因突变Ｃ．基因互换　　　Ｄ．染色体变异2．实施基因工程的最终目的是（　）Ａ．定向提取生物体ＤＮＡ分子　　　Ｂ．定向地对ＤＮＡ分子进行人工“剪切”Ｃ．在生物体外对ＤＮＡ分子进行改造　Ｄ．定向地改造生物的遗传性状当堂训练2、问：基因工程操作一般包括哪四个步骤？4.目的基因的检测和表达提取目的基因2.目的基因与运载体结合3.将目的基因导入受体细胞3．基因工程的正确操作步骤是（　　）①使目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的

3、基因的表达是否符合特定性状要求④提取目的基因Ａ．③②④①　　　Ｂ．④②①③Ｃ．④①②③　　　Ｄ．③④①②当堂训练基因操作的基本步骤(一）、提取目的基因供体生物细胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因限制酶问：提取目的基因要用什么工具？3、问：这四个步骤是如何进行操作的呢？基因操作的工具１、基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶）限制性内切酶是在生物体(主要是______生物)____的一种酶，能将______的______切断，由于这种切割作用是在DNA分子____部进行的，故名限制性内切酶。特点

4、：_______性。即______限制酶只能识别______特定的________序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。原核内外来DNA内特异一种一种核苷酸特定的切点专一性如:EcoRI限制酶黏性末端被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。被限制酶切割产生的DNA末端的形式黏性末端平末端被同一种限制酶切断的几个DN

5、A具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。4.（07广东高考题）现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是D当堂训练被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？思考:尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATT

6、CCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTCTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT练一练:GAATTCCGTAGAATTCGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAAGCTTAAAATTCGGATTGCCTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAG2、目的基因与运载体结合基因操作的基本步骤问：1、这一步骤要用到什么工具？基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶）基因的针线──DNA连接酶用与提取目的基因相同的限制酶切割质

7、粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。问：2、目的基因与运载体结合是如何操作的呢？CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGAATTCCGTAGAATTCGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAGCTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT目的基因质粒(运载体)问

8、：2、目的基因与运载体结合是如何操作的呢？相同的限制酶2、基因的针线──DNA连接酶连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。___________可把黏性末端之间的缝隙“______”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。连接的部位：DNA连接酶缝合磷酸二酯键，不是氢键3、基因的运输工具——运载体①能在宿主细胞中复制并保存。②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接。③具有标记基因，便于进行筛选。问：运载体所必须具备的条件有