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时间:2017-12-30
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1、细胞凝集反应的实验原理和方法实验原理细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖等专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成桥的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。实验用品 1、土豆块茎。 2、显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。 3、PBS缓冲液 称取NaC17.2g、Na2
2、HP041.48g、KH2PO40.43g、加蒸馏水,定容至1000ml调pH值到7.2。 4、2%的红细胞。以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),用生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。实验方法称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓液,漫泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集索。用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴,置载玻片上,充分混匀,静置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。以PBS液加2%血细胞液作对照实验。
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