快速生化检验在屠宰检疫中应用

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1、快速生化检验在屠宰检疫中应用　　摘要：快速生化检验在动物屠宰检疫中能帮助判定动物产品是否来源于健康动物。黄脂肉、黄疸、病死动物肉、旋毛虫肉、猪囊虫肉的快速生化检验技术简便，在屠宰检疫中有一定的实用价值。关键词：动物产品检疫生化检验在屠宰检疫工作中，往往受到时间限制，不允许长时间去仔细分析研究和试验。因此，在快速检疫中，除了凭感官检查，从感官性状、病理变化角度来判定动物产品是否来源于健康动物外，需要借助生化检验的方法加以判定，并做到既快速，又比眼观更科学、准确。2005年6月至2007年8月，笔者在城区定点屠宰场工作期间，通过对动物检疫工作中常见的黄脂肉、

2、黄疸肉、旋毛虫病肉、猪囊虫病肉的快速生化检验技术的应用，证明是一种简便、易行、可靠的方法，值得推广。1、黄脂肉与黄疸肉的快速鉴别检验1.1原理6采用氢氧化钠-乙醚法快速鉴别检验黄脂肉与黄疸肉。黄疸系因血中胆红素浓度增高，使脂肪含胆红素，胆红素与氢氧化钠溶液中钠离子结合成水溶性钠盐，使水呈黄绿色，而黄脂系天然色素沉着于脂肪，天然色素不与氢氧化钠作用，而被乙醚吸收，致使乙醚显色，从而判定是黄脂肉或黄疸肉。1.2试剂（1）乙醚；（2）5%氢氧化钠。1.3操作步骤取约2克剪碎的脂肪放于带塞试管中，加入5%氢氧化钠溶液5毫升，加热1分钟，并时时摇动，然后将试管冷却

3、到40℃时，加入等量的乙醚盖塞，微微摇振放试管架上静置分层，待分成两液层后观察两层的颜色变化。1.4判定黄疸：上层醚液无色，下层水液呈黄色并带混浊。黄脂：上层醚液黄色，下层水液无色，具混浊状。黄脂与黄疸并存：上下两液层均呈黄色。2、病死动物肉的快速生化检验2.1硫酸铜肉浸液（肉汤）反应2.1.1原理由于病畜肉中蛋白质分解，产生的球蛋白、蛋白胨、多肽与硫酸铜作用产生沉淀。利用硫酸铜肉浸液（肉汤）沉淀反应观察是否有沉淀来判定是不是病死动物肉。2.1.2试剂10%硫酸铜溶液。2.1.3操作步骤取肉浸液2毫升于试管中，取蒸馏水2毫升于另一试管中。向两支试管中分别

4、滴入10%硫酸铜溶液5滴，振摇，观察肉浸液混浊程度和白色沉淀的多少。蒸馏水管为阴性对照。2.1.4判定新鲜肉液体呈淡蓝色、透明。6次鲜肉液体稍混浊，有少量悬浮物。腐败肉液体混浊，有较多量的白色沉淀。2.2过氧化酶反应2.2.1原理过氧化酶能从过氧化氢中分解出氧，从而使氧化指示剂联苯胺生成联苯胺蓝，置后变色。病死动物肉中缺少过氧酶不能从过氧化氢中分解出氧，从而使联苯胺及过氧化氢，观察颜色变化从而判定是否是病死动物肉。2.2.2试剂（1）1%过氧化氢溶液取30%过氧化氢溶液1ml与蒸馏水29ml混合（现配现用）；（2）0.2%联苯胺酒精溶液取联苯胺0.2g溶

5、于95%酒精100ml中，于粽色瓶内保存，有效期不超过一个月。2.2.3操作步骤用移液管吸取1：10的肉浸液2ml于试管中，然后向试管中加入5滴0.2%联苯胺溶液，充分振荡，再加入2滴1%过氧化氢溶液，稍加振荡，立即观察3分钟内颜色变化的速度和程度。同时以蒸馏水作空白对照。2.2.3判定（1）30～90秒内肉浸液呈蓝色（后转为褐色）为健畜肉。（2）3分钟内肉浸液颜色无变化或呈淡青棕色为病畜肉。2.3肉浸液氢离子浓度的测定（PH试纸法）2.3.1原理由于患病和宰前极度疲6劳的动物宰前肌糖元的消耗较多，宰后产生的乳酸和磷酸较少，肌肉的PH值保持在较高水平。2

6、.3.2测定工具PH试纸，PH比色计或PHS-29A型酸度计。2.3.3操作步骤将1：4肉浸液滴于PH（5.4-7.0）精密试纸条的一端，数秒钟后与标准比色板比较，直接读取PH值的近似数。2.3.4判定PH值低于6.4为健畜肉，PH值高于6.4为病畜肉。2.4细菌毒素氧化呈色反应2.4.1原理沙门氏菌污染肉常引起人食物中毒，沙门氏菌有产生内毒素的特点，而内毒素中的多糖质有抑制高锰酸钾还原美蓝的作用，从而使美蓝呈色，以此来判定是否受沙门氏菌污染。2.4.2试剂（1）无菌生理盐水；（2）5%草酸溶液；（3）0.1%美蓝溶液；（4）0.5%硝酸银溶液；（5）1

7、：1盐酸，以浓盐酸60ml与蒸馏水60ml混合；（6）1%高锰酸钾溶液，置有色瓶内，可保存几天，最好临用时配制；（7）0.1N氢氧化钠溶液。2.4.3样品处理6称取10克去脂肪及结缔组织的被检肉样置于绞肉机玻璃容器中绞碎，加入10毫升灭菌生理盐水和10滴0.1N氢氧化钠溶液，将肉在乳钵内磨成状，转入三角瓶中，加热煮沸，使蛋白质沉淀。沉淀后将烧瓶冷却，冷却后加入5滴5%草酸溶液中和，过滤，滤液备用。2.4.4操作步骤取清洁无菌试管两支，一支加入被检溶液2毫升，另一支加2毫升灭菌生理盐水作对照。依次向两支试管中分别加入下列试剂：1滴0.1%美蓝溶液：3滴0.

8、5%硝酸银溶液：1滴盐酸（1：1）溶液，加毕后振摇混匀。再加入0.15毫升1%高