第56章血液分析技术和相关仪器ppt课件.ppt

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1、第五、六章血液分析技术与相关仪器血液分析技术与相关仪器血液分析仪器是临床实验室最常用的分析仪器，包括：血细胞分析仪血液凝固分析仪血液流变学分析仪第一节血细胞分析仪一、血细胞分析仪概述血细胞分析仪(Bloodcellanalyzer,BCA)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液学自动分析仪(AHA)。ABCC代表早期的低档次BCA，AHA外延过大。发展史手工计数仪器简单计数两分群三分群五分群五分群＋网织红20世纪40年代末，电阻抗法微粒子计数专利50年代

2、，CoulterModelA型用于临床60年代，测定参数达7项70年代，全血细胞计数（CBC）80年代，双通道、白细胞2~3分群、五分群90年代以来，多功能、多参数、流水线二、仪器分型检测原理基本结构（一）血细胞分析仪分型按自动化程度按检测原理按对白细胞的分类水平嗜酸性细胞淋巴细胞单核细胞中性粒细胞血小板嗜碱性细胞血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体电阻值大于稀释液的电阻值当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时，在内外电极之间恒流源电路上，电阻值瞬间增大，产生一个电压脉冲信号产生的脉冲信号数，等于通过的细胞数，脉

3、冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比(二)电阻抗法血细胞检测原理电阻抗法血细胞检测原理1.白细胞的检测仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道(channel)。每个通道：1.64fl根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图（Histogram）。经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了变化！！！第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小）：一般在35～90fl。第二群（90～160fl）是单个核细胞区，（中间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常

4、细胞等第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大）：一般在135-350fl%3590160300400450(fl)2.红细胞和血小板的检测红细胞和血小板共用一个小孔管，正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限，血小板计数准确容易。CPU对血小板和红细胞分布图进行判断浮动界标血小板分析与干扰因素（三）联合检测型原理主要体现在白细胞分类，实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出，发现异常细胞。共有特点是：均使用了鞘流技术。前鞘流后鞘流检测窗1.容量、电导、光散射检测技术光散射电导

5、性电阻抗每个细胞接受三维分析，定义到三维散点图的相应位置体积(volume，V)电阻抗原理测定细胞体积和数量电导性(conductivity，C)高频电磁探针，测量细胞内部结构，细胞内核浆比例光散射(scatter，S)细胞内粗颗粒的光散射强度要比细颗粒更强。2.光散射与细胞化学联合检测技术这类仪器是应用激光散射与细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数。高角度前向散射光：细胞核及颗粒的信息低角度前向散射光：细胞大小的信息结合细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数3.多角度激光散射联合检测技术（multi-anglepol

6、arizedscatterseparationofwhitecell,MAPSS）基本原理：基于细胞大小、折射率、核形、核浆比值、以及颗粒性质等，均可影响不同角度下的散射光强度。不同白细胞在以上几个方面完全一致的几率很小，从而对白细胞进行分类。①0°：前角光散射（1°～3°），可粗略测定细胞大小。②10°：狭角光散射（7°～11°），可测定细胞内部结构相对特征。③90°：垂直光散射（70°～110°），测定细胞核分叶情况。④90°：消偏振光散射（70°～110°），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。4.电阻抗、射频与细胞化

7、学联合这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术，通过4个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。嗜酸性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统淋巴、单核和粒细胞检测系统幼稚细胞检测系统白细胞分类散射图联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一个细胞，综合分析实验数据，从而得出较为准确的白细胞“五分群”结果。（四）网织红细胞检测原理网织红细胞中嗜碱性物质RNA，在活体状态下与特殊的荧光染料结合。荧光强度与RNA含量成正比。用流式细胞术检测网织红细胞大小和RNA含量

8、及血红蛋白的含量。细胞与试剂反应前后的变化反应前反应后荧光(RNA)强度ReticulocytesPLTRBC高荧光强度低荧光强度低荧光强度WBC前向散射光(细胞大小)血细胞分析仪网织红细胞成熟度分类（五）血红蛋白测定原理除干式、无创型外，各型BCA对血红蛋白测定都采用光电比色原理血细胞悬液中加入溶血剂后，红细胞溶解释放出血红蛋白，后者与溶血剂