免疫学检测技术PPT课件.ppt

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1、第十四章免疫学检测技术抗原和抗体可以发生高度专一性的结合抗原和抗体可以发生高度专一性的结合抗原和抗体可以发生高度专一性的结合抗原或抗体检测原理：借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象，对标本中的抗原或抗体进行定性或定量的检测。Equivalence–Latticeformation抗原和抗体可以发生高度专一性的结合抗原或抗体检测原理免疫学（Immunology）：是研究抗原性物质、免疫系统、免疫应答的规律及免疫应答的调节的一门科学。免疫的定义（Immunity）：免疫是机体识别自我与非自我的过程。排除异己，维护自身稳定的生理反应。免疫的功能：1.抵抗感染（Defense）：

2、机体能抵抗病原微生物侵袭的能力。又称免疫防御。抗菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生虫免疫2.自身稳定（Homeostasis）：机体在新陈代谢过程中，产生大量的衰老死亡细胞，免疫的第二个功能就是清除这些细胞，维持机体的生理平衡。3.免疫监视（Immunologicalsurveillance）：机体细胞会因物理、化学和病毒等生物因素的影响，使细胞发生癌变，形成肿瘤等，机体可识别、清除这些细胞，这是免疫系统的第三个功能。当这一功能低下或失调时，会导致肿瘤或癌症。抗原（Antigen）抗原概念凡能刺激机体产生特异性抗体和致敏淋巴细胞，并能与相应抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生反应的物质。抗

3、原性（Antigenicity）：包括免疫原性和反应原性二个方面免疫原性：抗原能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞的性能。反应原性：抗原与特异性抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生反应的性能。抗原（Antigen）构成抗原的条件1.异物性：机体免疫细胞能识别自身和异己物质，只有外源性的物质才具有免疫原性，产生免疫反应。亲缘关系越远，差异越大，抗原性越强。自身抗原：自身组织发生异常变异、免疫功能紊乱、眼球晶体蛋白、精子蛋白、甲状腺蛋白大分子胶体：一般在10kD以上。3.具有复杂的立体结构或空间构象.如明胶分子量虽然为100kD，但结构简单，免疫原性差。抗原如何被识别抗原的特异性抗原决定簇

4、：抗原分子表面具有免疫活性的化学基因,是抗原与抗体结合的部位。抗原分子中抗原的特异性由抗原决定簇决定。一种细菌可以刺激多少种抗体产生？抗原一种细菌可以刺激多少种抗体产生？根据抗原的化学性质分：天然抗原：微生物及其产物抗原如菌体抗原（O抗原）鞭毛抗原（H抗原）表面抗原（如大肠杆菌的K抗原）细菌的毒素抗原病毒抗原（V抗原）人工抗原：人工合成多肽、蛋白等抗体（Antibody)一、概念是抗原刺激B淋巴细胞,使之增殖分化成浆细胞而产生的能与抗原发生特异性反应的免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)抗体（Antibody)一、概念二、免疫球蛋白的基本结构免疫球蛋白：在人和动物血液

5、、组织液及其他分泌液中的一类结构相似的球蛋白。1.由4条肽链组成：2条重链，2条轻链2.一个抗体单分子：2个抗原结合位点抗体（Antibody)抗体（Antibody，Ab)免疫球蛋白的双重性免疫球蛋白是一种蛋白质，是抗体(Ab1)；同时又可引起机体产生抗体（抗抗体,Ab2），所以既是抗体又是抗原。AgAb1Ab2抗体（Antibody，Ab)免疫球蛋白的双重性免疫球蛋白的功能1.与抗原结合2.激活补体3.组织结合4.调理作用5.抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC）免疫球蛋白的功能抗体（Antibody)的产生与功能抗体产生的主要过程抗体注射抗原（如类毒素）血清抗体？抗原？抗

6、体的制备抗体的制备抗血清：指抗原人工免疫实验动物，获得含特异性抗体的血清。多克隆抗体(PAb)：多个抗原决定簇免疫机体所产生的多种抗体的混合物。单克隆抗体（monoclonalantibody，MAb）：只针对某一特定的抗原决定簇，纯度高的抗体。多克隆抗体与单克隆抗体多克隆抗体与单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备骨髓瘤细胞脾脏淋巴细胞（HGPRT-TK-)（HGPRT+TK+）在HAT中不能生长体外培养过程中死亡↓←PEG杂交瘤细胞(HGPRT+、TK+)↓在HAT中大量长期繁殖↓克隆化↓产生单抗第一节免疫学检测技术原理抗原或抗体检测原理：抗原抗体的结合具有高度专一性借助抗原和抗体

7、在体外特异结合后出现的各种现象，对标本中的抗原或抗体进行定性或定量的检测。对抗原或抗体进行定性或定量的检测的原理AbexcessAgexcessEquivalence–Latticeformation对抗原或抗体进行定性或定量检测的原理根据抗原抗体形成的免疫复合物的浓度进行定量检测。P312第一节免疫学检测技术原理可作为抗原进行检查的物质：微生物及其大分子产物人和动物细胞人和动物体内的各种大分子各种半抗原抗原或抗体检测原理较早的抗原抗体反应检测方法1、凝集反应（Agglutina