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时间:2020-09-14
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1、动物实验基本技术一、实验动物标记编号的方法(一)染色法:1、单色涂染法:在每组动物不超过l0只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:3-5%苦味酸溶液,可染成黄色。第一节小鼠方法步骤:(1)涂染顺序:从左到右、从上到下。(2)左前肢为l号、左侧腹部2号、左后肢3号。(3)头部4号、背部5号、尾根部6号。(4)右前肢7号、右侧腹部8号、右后肢9号。(5)不作染色标记为10号。2、双色涂染法:在每组动物不超过100只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:(1)3-5%苦味酸溶液,可
2、染成黄色。——作为“个”位数。(2)0.5%中性红或品红溶液,可染成红色。——作为“十”位数。方法步骤:(1)用两种颜色同时进行染色标记。(2)用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,个位数的染色标记方法同单色涂染法。(3)用品红(红色)染色标记作为十位数,(4)左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号,头部40号、背部50号、尾根部60号,右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号第100号不作染色标记。二、小鼠的抓取保定:器材:小鼠饲养盒+面罩1套。方法步骤:1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中
3、部将小鼠提起,放在饲养合的面罩上。2、用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后、颈背部的皮肤,将小鼠提起。3、翻转左手掌,以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条直线。4、用左手无名指压住小鼠背部的皮肤,小指压住小鼠的尾巴根部。5、松开捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。三、小鼠的给药方法:(一)灌胃给药原理:将药液直接注入小鼠的胃内。器材:小鼠灌胃针1支、注射器1支、小鼠饲养盒+面罩1套、生理盐水、烧杯。方法步骤:1、将灌胃针连接在注射器上,吸入一定量的药液。2、左手捉持小鼠,使小鼠头部
4、向上。3、右手将灌胃针头尖端从小鼠口角处进针放进小鼠口咽部,顺咽后壁轻轻往下推,灌胃针会顺着食管滑入小鼠的胃内。灌胃针插入约3cm.4、用右手食指将针栓慢慢往下压,将注射器中的药液灌入小鼠的胃中。剂量:约0.5ml/10g体重。注意:在灌胃过程中,避免误插入气管。(二)注射给药1、皮下注射给药:原理:将药液注入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。器材:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)注射部位:选小鼠项背部的皮下。(2)常规消毒注射部位的皮肤,用注射
5、针头取一锐角角度刺入皮下,(3)将针头轻轻向左右摆动,易摆动则表示已刺入皮下,再轻轻抽吸,如无回血,可缓慢地将药物注入皮下。注射量:0.01ml—0.03ml/g体重。2、肌肉注射给药原理:将药液注入动物的肌肉组织,经毛细血管吸收进入血液循环。器材:1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)操作时1人先将小鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住小鼠的1条后肢,右手拿注射器,常规消毒注射部位的皮肤。(3)将注射器针头在动物后肢大腿外侧肌肉丰富处呈60度角迅速刺入后注入药液。注
6、射量:0.01m1/g体重。3、静脉注射给药原理:将药液注入小鼠的尾静脉。器材:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、金属笼或小鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)将小鼠放在金属笼或小鼠固定器中,通过金属笼或小鼠固定器的孔拉出小鼠尾巴。(2)用左手捏住小鼠尾巴中部,用75%酒精棉球反复擦拭尾部。(3)注射时,以左手拇指和中指捏住鼠尾两侧,用食指从下面托起尾巴,以无名指夹住尾巴的末梢。(4)右手持4号针头的注射器,使针头与静脉平行(小于30度角)。(5)从小鼠尾巴下1/4处进针,仔细观察,如果无
7、阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,即可注入药物。(6)拔出针头后,用干棉球压住注射部位约l、2min,防止出血。注射量:0.005m1—0.01m1/g体重。4、腹腔注射给药原理:将药液注入小鼠的腹腔。器材:注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)用左手将小鼠捉持保定,使鼠腹部朝上,鼠头略低于尾部。(2)右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺。(3)针头刺入皮下后进针3mm左右,接着使注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌,穿过腹肌进入腹膜腔,当针尖穿过腹肌进入腹膜
8、腔后抵抗感消失。(4)固定针头,保持针尖不动,回抽针栓,如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量:0.01m1—0.02m1/g体重。三、小鼠的采血——摘除眼球采血法:原理:将小鼠的眼球摘除后取血液的方法。器材:眼科弯镊、试管。方法步骤:(1)左手抓住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位;(2)左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球突出。(3)用眼科弯镊夹去眼球,将鼠倒立,用试管接住流出的血液。(4)采血完毕立即用纱布压迫止血。采血量:每次0.6-1.0ml/次。一、大鼠的
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