仪器分析仪器分析在微生物检测中的应用.doc

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1、仪器分析方法在食品微生物快速检测方面的应用摘要:从食品安全的角度出发,系统地介绍几种检测微生物的仪器分析方法,包括气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、毛细管电泳(CE)技术和质谱(MS)技术等,以及它们在食品微生物快速检测中的应用。这些方法与传统方法相比具有简单、快速、特异性强等特点。随着科技的进步,必将有更多的仪器分析方法应用到食品微生物检测中,在食品微生物快速检测鉴定领域开辟一个新的应用时代。关键词:食品安全;微生物;分析检测Abstract:Thisreviewsystematic

2、allyintroduceseveralkindsofinstrumentalanalysismethodsformicroorganism,aswel1astheapplicationofthesemethodsinfoodrapidmicrobialidentification.Thesemethodsincludegaschromatography(GC),highperformanceliquidchromatography(HPLC),capi1laryelectrophoresis(CE

3、)andmassspectrometry(MS),etc.Comparedwiththetraditionalmethods,instrumentalanalysisaremoresimple,rapidandprecise.Withthedevelopmentofscienceandtechnology,morekindsofinstrumentalanalysismethodswi11beappliedtofoodmicrobialdetermination,whichtakesanewerao

4、fapplicationoffoodmicrobialdeterminationandidentification.Keywords:foodsafety;microorganism;analysisanddetermination食品是人类赖以生存和发展的物质基础,因此,食品安全关系到国计民生和人体健康。目前,食品安全形势不容乐观,根据WHO统计,全球每年有近15亿人感染食源性疾病,其中70%是食品中微生物污染引起的。通过检测食品中的微生物,可以加强食品安全,有效防止食源性疾病。传统的微生物分析检

5、测方法存在操作繁琐、时间长、灵敏度低、出现假阳性等缺点。因此,寻求快速、准确以及灵敏的微生物分析检测方法已成为全球热门焦点。目前,常见的微生物分析检测方法包括生化检测技术、免疫学技术、PCR技术以及基因芯片技术等,仪器分析方法应用相对较少。本文着重从仪器分析角度介绍几种微生物的分析检测方法。1气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(HPLC)在微生物检测和分析中的应用:气相色谱和高效液相色谱的分析应用到微生物的检测中,主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异,利用上述色谱检测可直接分析各种体

6、液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等,以确定病原微生物的特异性化学标志成分,协助病原诊断和检测。其中气相色谱应用较多,该方法简单快速。其原理是将微生物细胞经过水解、甲醇分解、提取以及硅烷化、甲基化等衍生化处理后,使之分离尽可能多的化学组分供气相色谱仪进行分析。不同的微生物所得到的色谱图中,通常大多数的峰是共性的,只有少数的峰具有特征性,可被用来进行微生物鉴定,大量分析检测各种常见细菌、酵母菌、霉菌等。结果表明,本方法可以分析细胞内16种脂肪酸。在所分析的5种菌中,最多的含

7、有11种脂肪酸,最少的含有7种。通过对其脂肪酸种类的对比可以分辨出这5种菌种,并且得出了这5种菌的指纹图谱,可对菌种进行鉴定分析。[1]顶空气相色谱法也已广泛应用,通过检测培养基或食品密封系统顶部的微生物挥发性代谢产物C02,来分析和鉴定微生物。特别是用于分析食品中的酵母菌、霉菌、大肠菌群和乳酸菌的污染程度,以及对沙门氏菌的筛选,对评价食品品质和安全性具有重要的意义。该方法具有灵敏度高,检测快速。利用酸性末端产物气相色谱分析判定产氢细菌,试验结果显示,如果乙醇和乙酸占液相末端产物质量分数95.0%-

8、99.0%,可以认为该细菌是发酵产氢细菌。[2]此外,热裂解气相色谱(Py-GC)在分析细菌方面具有化学分类学价值,可用于实验室检测或鉴定细菌。该法是利用细菌热裂解产生的特有生物标记物,如2-吠喃甲醛、毗唳二梭酸等,进行细菌检测和鉴定。根据细菌裂解产物的图谱分析,即可进行菌种鉴定。高效液相色谱也有较广泛的应用,主要用于对多组分混合物的分离。这种方法不仅使以往的柱色谱法达到高速化,而且其分离性能大大提高。采用HPLC检测分析饮用水中的蓝细菌毒素,观察范围内呈现良好的线性

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