转基因技术的应用.doc

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1、基因转移方法，综述了转基因技术在各个领域方面的应用概况，并对转基因植物的前景作了展望。关键词：植物；基因；转基因技术TheapplicationofthetransgenictechnologyAbstract:Thisarticlesystematicallyintroducestheplantgenetransfermethod,thispaperreviewedtheapplicationoftransgenictechnologyinallareasofgeneralapplication,andthetransgenicplantspr

2、ospectsaredescribed.Keywords:Plants;gene;geneticallymodifiedtechnology将外源或者人工修饰的基因导入植物基因组并稳定表达，可改变生物体性状并遗传下去，这就是植物转基因技术。1983年，人类首次获得转基因植物，1986年美国和法国的科学家第一次进行了抗除草剂转基因烟草的田间试验[1]。此后,植物转基因的研究与应用在世界各地蓬勃发展，并创造了巨大的经济效益。随着研究的深入，转基因植物的应用被不断拓宽，在农业上取得巨大经济效益的同时，其在医疗、资源、环境污染处理等方面的研究也吸引了越来

3、越多的研究者。1国内转基因植物研究现状在国家“863”术研究与发展计划及国家科技攻关计划的资助下，我国转基因植物的研究和应用取得了显著的进展，主要是在植物抗虫、抗病、植物抗逆、植物品质改良、植物叶绿体等基因工程和植物生物反应器方而，有些研究已经达到国际先进水平。据1996物技术学会统计，我国投入研究和开发的转基因植物达47涉及各类基因103种。近年来有20种转基因植物进入了田间试验或环境释放阶段。目前我国有3种转基因植物被批准进入商品化生产，包括我国自己培养的耐储存番茄、抗虫棉、观赏植物矮牵牛、抗病毒甜椒、抗病毒番茄，以及美国孟山都公司培育的抗虫

4、棉。在上述转基因作物中，种植面积最大的是抗虫棉，中国的抗虫棉（Bt棉）占整个棉花面积的20%[2]o2植物基因转移的主要方法转基因植物研究取得了令人鼓舞的突破性发展。十儿年来转基因植物这一技术日趋完善在提高植物抗性、良作物品质以及作为生物反应器生产有用的化合物等改方面发展迅速植物转基因方法可分为生物学、化学和物理学方法三大类。生物学方法有农杆菌介导转化法、花粉管通道法、病毒介导法等；物理学方法包括基因枪法、显微注射法和电激穿孔法等；化学方法包括聚乙二醇法、脂质体法等。在上述多种方法中，占主导地位的是农杆菌介导法，常用的还有基因枪法。农杆菌介导法的

5、原理是：在农杆菌基因chvA,chvB,pscA,andatt家族所编码的蛋白和植物伤曰产生的酚类物质和糖类物质的共同作用下，农杆菌识别并附着在宿主细胞壁上。virD4和virB基因编码蛋白组成的typelV分泌系统将单链VirD2-T-DNA复合体运送到宿主细胞-1-进入宿主细胞中。在宿主细胞质中,VirE2蛋白与VirD2-T-DNA复合体结合。在VirD2核定位信号、某些农杆菌蛋白和宿主细胞蛋白的共同作用下，VirD2-T-DNA复合体进入细胞核[3]o基因枪转基因技术：由康奈尔大学Sanford提出，是将目的基因包裹在直径在微米级的球状金

6、粉或钥粉颗粒上，用火药爆炸或高压气体加速金属微粒将其送到受体植物细胞中，再通过组织培养获得完整植株。3转基因细胞的鉴定目的基因进人细胞后，能否在正常的植物体上准确表达，还必须对植株进行转基因细胞鉴定现常用报告基因对一些细胞进行鉴定。报告基因是用于检测基因在导人受体细胞后，是否具有功能的一种指示基因,常用的报告基因有如下儿类：3.1Cat基因乂叫氯霉素乙酰转移酶基因，来源于细菌转座子Tn9导人转基因细胞后表达产物是氯毒素乙酰转移酶，可催化氯霉素形成3一乙酰氯霉素和1,一二乙酰氯霉索,3而使抗生素失活。凡导人细胞后，能抗氯霉素，就是转基因细胞。3.2

7、nptll基因新毒素磷酸转移酶基因,也称氨基葡萄糖背磷酸转移酶基因。是从细菌转座子Tn5中分离出来的nptll导人细胞后，可以使转化细胞对氨基葡萄糖甘类抗生素（卡那霉素、庆大霉素）产生抗性。如果nptll转人细胞后，能够使抗生素失去活性,就说明日的基因在受休细胞中得到了表达。3.3荧光素酶基因来源于细菌或荧火虫。此基因导人受体细胞后如果能表达就能产生荧光素酶，此酶在Mg24和ATP存在的条件下，可以氧化荧光素。在氧化过程中发出荧光河用荧光器测定，如荧光较强，可以在暗处看到,如果看到荧光，就说明目的基因在受休细胞中得到了表达，反之则没有表达[4]3

8、.4冠瘦碱合成酶基因导人受体细胞后，如果是转墓因细胞，冠瘦碱合成酶基因就能表达，产物是冠瘦碱（如：章鱼碱、胭脂碱），可通过鉴定冠瘦碱来确