微生物与免疫学课件：免疫学诊断与防治.ppt

《微生物与免疫学课件：免疫学诊断与防治.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、免疫诊断与防治免疫诊断诊断疾病、研究发病机制、监测病情、评价疗效测抗原、抗体；免疫细胞数目、功能原理：抗原抗体反应是高度特异性的、一对一的反应。体外，可以用一个已知的抗原（或抗体）来检测另一个未知的抗体（或抗原）。Ab通常存在于血清中，故称为血清学反应。抗原抗体的体外检测一、抗原抗体反应的特点高度特异性抗体的V区与相应抗原决定基特异结合抗原抗体结合具有可逆性表面化学集团之间的可逆结合抗原与抗体比例合适AgAb比例影响IC的大小，比例合适形成肉眼可见的物质抗原抗体反应的2个阶段：肉眼不可见结合阶段肉眼可见的聚合阶段Ag-Ab结合的带现象二、AgAb反应的影响因素AgAb浓度与比例——影

2、响最大电解质0.85％NaCl温度37℃酸碱度PH6～8抗原抗体反应的类型凝集反应（agglutinationreaction)沉淀反应(precipitationreaction)免疫标记技术（一）凝集反应(agglutination)－－颗粒性Ag与相应Ab结合后，出现肉眼可见的凝集物。直接凝集反应   颗粒性Ag直接与待检Ab，反应出现的凝集现象。玻片法如:ABO血型鉴定单向免疫扩散(singlelagarimmunodiffusion)双向免疫扩散(doubleagarimmunodiffusion)火箭电泳（rocketelectrophoresis)对流免疫电泳（cou

3、nterimmunoeletrophoresis)免疫印记技术又称为westernblotting（二）沉淀反应可溶性Ag加相应Ab在电介质参与下，出现沉淀物。原理示意图AbAg模拟图染色标本图1.抗原抗体双向自由扩散2.24小时出结果3.呈现沉淀线或弧免疫标记技术是用同位素，荧光素，酶作为标志物标记Ab(Ag)进行抗原抗体反应的方法。敏感度高，可以定性，定量或定位检测。三大标记技术:同位素标记技术;免疫荧光技术;酶免疫测定免疫标记技术1.酶免疫测定法(enzymeimmunoassay，EIA)原理:酶催化底物的高效性与Ag-Ab反应的特异性相结合，催化酶底物显色，判断结果。既可定

4、性也可定量，其敏感度高。(ng-pg/ml)标记酶:(HRP)；底物:邻苯二胺(OPD)，二氨基联苯胺(DAB)。酶联免疫吸附实验，是应用酶标记的抗体（或抗原）在固相支持物表面检测未知抗原（或抗体）的方法。酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)待测A待测B待测C底物显色:颜色的深浅与血清中抗体的量成正比包被乙肝Ag一抗:人抗病毒抗体(IgG)二抗:羊抗人IgG抗体-辣根过氧化物酶酶联免疫吸附试验（ELISA）免疫学防治免疫预防免疫治疗建立、增强或抑制机体的免疫应答，以预防、治疗疾病和提高疗效。第一节免疫预防人为输入抗原刺激机体应答

5、，或输入抗体使机体获得特异性免疫力，从而有目的地预防某些疾病。人工主动免疫人工被动免疫人工主动免疫法（预防接种）概念：给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生特异性免疫。抗原物质：1）疫苗（Vaccine）：死疫苗、活疫苗2）类毒素：3）亚单位疫苗：4）基因工程疫苗：重组抗原疫苗、DNA疫苗（1）疫苗（Vaccine）概念人工主动免疫的生物制品。疫苗的种类死疫苗：选用免疫原性强的病原体，经人工培养后，用理化方法灭活制成。伤寒、乙脑、霍乱、百日咳、狂犬病流脑斑疹伤寒、钩端螺旋体等疫苗减毒活疫苗：用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活病原体制成的制剂。卡介苗（BCG）、麻疹、

6、脊髓灰质炎疫苗等类毒素：0.3％～0.4％甲醛处理细菌的外毒素，使其失去毒性保留免疫原性，即成类毒素。如：白喉、破伤风类毒素亚单位疫苗：提取病原体中可刺激机体产生保护性免疫的抗原成分制成的疫苗。如：流感、霍乱亚单位疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗：----用基因工程技术，将目的基因通过人工方法表达，制备成具有免疫原性的疫苗。重组抗原疫苗：用基因工程的技术将编码有效免疫原的基因插入载体，再导入宿主细胞，使之表达大量病原体抗原，提起纯化成疫苗。如：HbsAg疫苗DNA疫苗：将编码有效抗原的基因插入到质粒DNA当中，建成重组质粒，在导入机体组织细胞，达到免疫接种目的。它既是载体又能表达有效蛋白抗

7、原的重组质粒，称为DNA疫苗。转基因植物基因：将目的基因导入食用植物细胞基因组中，植物可食用部分稳定表达目的基因产物，人和动物摄食获得免疫。计划免疫：根据某些特定传染病的疫情监测和对人群免疫状况的分析，按规定的免疫程序有计划地进行人群预防接种，提高人群免疫水平。控制、消灭传染病二、人工被动免疫法概念：给机体注入抗体等制剂，从而获得特异性的免疫力的方法。特点：立即生效，维持时间短，用于治疗或紧急预防。免疫血清种类：1）抗毒素2）丙种球蛋白3）人特异性Ig1）