植物细胞膜透性的测定.doc

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1、实验二植物细胞膜透性的测定——电导仪法一、原理：植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透过性能力，当植物体受到逆境影响时，如高温或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。这样，比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱，因此，电导法目前已成为作物抗逆性栽培、育种上坚定植物抗

2、逆性强弱的一个精确而实用的方法。二、植物材料及仪器设备：1.植物材料：黄瓜叶片（完全培养下的黄瓜叶片和不同浓度铅溶液胁迫下的黄瓜叶片）2.仪器设备：冰箱、恒温箱、真空泵（附真空干燥器）1套、电导仪、恒温水浴箱、剪刀、打孔器、镊子、试管架、具塞普通试管5支、10ml移液管（或移液枪）、玻璃棒、吸球、洗瓶、滤纸、保鲜膜等。三、实验步骤：1.清洗用具：实验所用的玻璃器皿用洗衣粉清洗→自来水洗干净→去离子水润洗→倒置在试管架上，备用。2.将不同处理的黄瓜叶片分别用自来水洗干净并用去离子水润洗，再用洁净滤纸吸干表面水分。用6~

3、8min的打孔器避开主脉打取圆叶片（或切割成大小一致的叶块），每组叶片打取30片小圆片，分装在2支洁净的试管中，每管放15片。3.在装有叶小圆片的试管加入15ml去离子水，用保鲜膜封口，并用解剖针将保鲜膜扎几孔（以防止叶圆片在抽气时翻出试管）以便抽气。然后将试管放入真空干燥箱中用真空泵抽气10min，以抽出细胞间隙的空气，然后缓缓打开进气阀，空气重新进入干燥箱时水即被压入组织中而使叶片下沉（即水渗入细胞间隙，叶片变成半透明状，沉入水下）4.将以上试管置室温下30min，期间要多次摇动试管，促进水分交换。5.30min

4、后将各试管充分摇匀，用电导仪测其初电导值，同时测定去离子水的电导值作为空白对照组。6.测完初电导值后，将各试管放入100℃沸水中10min，以杀死细胞组织，取出试管后用自来水冷却至室温后，摇匀，测其终电导值。四、结果计算：1.相对点导度=初电导值-空白电导值/终电导值-空白电导值2.伤害率（%）=（逆境叶片的相对点导度-正常叶片的相对点导度）/（1-正常叶片的相对电导度）×100五、注意事项：1.所取的叶片叶龄要一致。2.整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净，也不要用手接触叶片，以免污染。3.抽气要使叶片下沉才能与

5、水分充分进行交换。4.CO₂在水中的溶解度较高，测定电导时要防止CO₂气源和口中呼出CO₂进入试管，以免影响结果的准确性5.温度对溶液的电导影响很大，测定必须在相同温度下测定。