玻璃器具硅烷化.doc

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1、玻璃器具硅烷化一.实验原理玻璃表面存在硅醇基团(Si-OH)，可对蛋白质等样品产生吸附，造成样品损失。该类基团可用硅烷化法进行封闭处理，通过硅烷化试剂二甲基二氯硅烷或六甲基二硅胺与载体表面进行反应，除去该类基团的氢键结合能力，以改善载体表面的性能，减少对样品的吸附。在处理低浓度的特别“黏”的溶解物如单链核酸或蛋白质时尤其重要。二.试剂器材-氯三甲基硅烷或二氯二甲基硅烷-真空泵-干燥器三.操作步骤方法一：1.配制含6%二甲基二氯硅烷的甲醇溶液(硅烷化剂)；2.将玻璃器皿洗净(建议用重铬酸钾洗液浸泡清洗)、

2、干燥；3.在通风橱内将硅烷化剂倒入玻璃器皿内，使其接触器皿内表面并停留10sec以上。期间搅拌或振荡可使硅烷化剂与玻璃的反应更完全和均匀；4.倒去硅烷化剂，用甲醇洗去过量的硅烷化剂，将玻璃器皿自然晾干，然后100℃加热1hr。方法二：1.在通风橱内将要硅烷化的玻璃器具或仪器和装有1-3ml氯三甲基硅烷或二氯二甲基硅烷的烧杯放入干燥器内。氯三甲基硅烷和二氯二甲基硅烷蒸气有毒性且高度易燃。也可用溶于易挥发的有机溶剂(如氯仿或庚烷)中的约5%的二氯二甲基硅溶液简要地冲洗，或浸透其中，有机溶剂蒸发使二氯二甲基硅

3、沉积在器具表面。1.将干燥器连接到真空泵上，直到硅烷开始沸腾，关闭泵连接维持干燥器内真空，直到液体硅烷挥发完毕(约1-3hr)2.在通风橱内打开干燥器，使硅烷蒸汽散掉。3.180℃烘烤玻璃器具或仪器2hr。一.注意事项：-二甲基二氯硅烷有毒，易挥发、易燃，使用时应注意戴橡胶手套、工作服及防护镜，并在防爆通风橱内进行；-二甲基二氯硅烷应避光密闭保存。长期存放会与水反应，并可自发聚合，产生云雾状沉淀而降低有效成分，可通过滤纸过滤除去多聚物；-玻璃器皿反应前务必干燥，可用200℃干燥15min；-当玻璃器皿重

4、新变得亲水时表明硅烷化层已经破坏，需要重新处理；-废弃硅烷化剂的处置：在硅烷化剂中加入水，然后按一般可燃液体处置方法处理。