荧光显微镜实验报告.doc

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1、《形态观察技术与原理》实验报告日期：2015年10月28日姓名：高海艳学号：实验三　荧光显微镜的操作技术[一、实验目的]1、了解荧光显微镜的结构及其成像原理。2、掌握使用荧光显微镜来观察被荧光染料染色的生物标本的操作技能。[二、实验原理]荧光显微术的原理是以紫外线为光源，照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。此次所用的落射式显微镜在光路中具有分光镜，光源来自被检物的上方，故对透明与非透明被检物都适用。荧光显微术可用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。[三、实验仪器]　　OLYMPUS-BX51荧光显微镜[四、实验步骤]1.将样品置于载物

2、台上,打开明场电源开关；2.打开汞灯电源开关（严禁用手直接触摸！强紫外线能灼伤眼睛和皮肤，使用中应避免灯光的直接照射；灯管意外破损，导致汞蒸气散发，现场人员务必立即离开，让现场持续通风20-30分钟，防止汞蒸气被吸入体内而导致中毒；汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次开启）；3.将荧光光路shutter打开（“○”为开，“●”为关）（需保护样品时关闭shutter）；4.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置；5.通过两组减光滤片调节激发光强度；6.从低倍镜开始观察，调焦，找到预观察视野；7.依次换到高倍镜头，观察样品拍照时光路选择拉杆完全拉出。（汞灯在显微镜内

3、位置的检验: a. 将汞灯照明光路系统中的视场光阑开到最大; b. 把荧光滤光片组推到绿光激发的位置上,以避免汞灯中的蓝光太刺眼; c. 把观察的样品或一块载玻片放在物台上,盖上一张比盖玻片稍大且洁白的薄纸; d. 取下一个物镜,使激发光经物镜转换器的空档照在白纸上,白纸上会有一蓝色的圆形照明区域,e.分别调节集光镜对焦旋钮和汞灯位置调节钮,直至激发光光斑呈现清晰均匀的圆形照明区域.）[五、实验结果]植物根横切面如下图所示：