南农传染病实习报告.doc

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1、实习报告学院:动物医学院课程:传染病学实习班级:动医09X班学号:1XX09XXX姓名:大猪妖指导教师:王先炜职称:副教授实习时间2013年5月27日至2013年6月1日实习地点逸夫楼40172013年6月9日南京农业大学教务处制１４实习报告一、实习目的1.以副猪嗜血杆菌病和蓝耳病为模型，学习传染病的临床诊断、猪体剖检的方法，结合病理变化，对患病猪进行初步诊断；2.通过对感染猪体内病毒和细菌的分离鉴定，学习掌握细菌性猪病、病毒性猪病的实验室诊断方法。3.掌握畜禽传染病的临床诊断技术。4.掌握畜禽传染病实验室诊断方案的设计、诊断试剂的准备和检测结

2、果分析判定。5.掌握畜禽细菌与病毒混合感染的病原分离与鉴定技术。6.掌握细菌药敏试验指导畜禽临床用药。二、实习安排时间地点内容周一5月27日白天逸夫楼4017诊断试剂的配制；器皿的准备以及灭菌的处理周二5月28日白天逸夫楼4017病猪的临床诊断；病料的采取与处理；细菌的涂片检查与分离培养周三5月29日白天逸夫楼4017病毒的分离接种（病料过滤和接种细胞）；分离细菌镜检和增殖周四5月30日晚上逸夫楼4017细菌的生化试验、药敏试验和细菌鉴定；观察接种细胞周五5月31日江浦农场参观学习周六6月1日下午逸夫楼4017病毒细胞病变观察、菌落鉴定三、实习

3、内容第一天：王先炜老师讲解本周传染病学实习的主要内容，传染病临床诊断的主要方法，实验器材的准备，实习过程中的注意事项以及实习分组安排，将第一大组所有同学再分为三大组，9小组。准备实验器材，配制试剂观察动物发病情况检测病毒检测细菌病料匀浆反复冻融平板划线分离、肉汤接种细胞接种纯培养药敏实验生化试验病毒的初步鉴定细胞病变观察１４实验准备（一）灭菌消毒用品：手术刀片、手术刀柄、剪刀、大镊子、小镊子、剪刀、黄色枪头一盒、用锡箔纸包好小滤器（一组3至5个）、玻璃匀浆器、1.5mL离心管、PCR管。（二）其他用品：解剖盘、酒精灯、酒精棉球、解剖刀、记号笔、

4、注射器、染色缸、乳胶手套、接种环、载玻片、细菌涂布棒、倒置显微镜等。（三）试剂及配制1.TSA平板：每个组2—3块，全部9组一起配，按10组量配置，高压后然后分装。每块TSA平板的成分：TSA2g去离子水50mL121℃，15-20min，冷却至50℃左右，加入1.25mL的小牛血清，0.625mLNAD2.TSB液体培养基成分：全部小组依旧一起配制，高压后然后分装，每管液体培养基的成分：蛋白胨0.04g蛋白示0.04g酵母提取物0.05gTSB0.25g去离子水0.01L混匀后可分装小试管内（每管3mL）121℃，15-20min用之前每只试

5、管加1μL血清，1μLNAD血清：用前要灭能（56℃，40min）3.生理盐水：0.45gNaCI加入50mL去离子水，然后高压灭菌4.细胞维持液：在50ml的DMEM液中加入1ml的血清和1ml的双抗（青、链霉素）；（四）倒TSA平板将TSA溶液高压后冷却至60℃左右，加入1.25mL的小牛血清，0.625mLNAD。然后将平板边沿用酒精灯外焰烧一下后，将TSA倒入平板中，铺满。标记好班级，组号，名称和时间第二天：猪体剖解、细菌学检查和病毒学检查病料取样。王老师给每一大组安排了一位研究生给我们及时的指导。（一）外部检查观察被毛和营养状况，检查

6、四肢、眼结膜的颜色、皮肤等有无异常，下颌淋巴结是否有肿胀现象，肛门附近有无粪便污染等。触诊：下颌淋巴结，腹股沟淋巴结，髂下淋巴结１４（二）宰杀，固定和剖腹检查1.宰杀：劲动脉放血致死。因为猪对麻醉药不敏感，故不使用麻药，直接放血致死。2.固定：猪体取背卧位，先切断肩胛骨内侧和髋关节周围的肌肉（以部分皮肤与躯体相连），将四肢向外摊开，以保持尸体仰卧位置。3.腹腔剖开从剑状软骨后方沿腹壁正中线由前向后至耻骨联合切开腹壁，再从剑状软骨沿左右两侧肋骨后缘切开至腰椎横突。将其向两侧分开，腹腔脏器即可全部露出。按照脾、肠、胃、肾的次序检查，并逐一取出腹腔脏

7、器，观察脏器有无病变。4.胸腔剖开：打开胸腔后先看心包膜有无粘连、是否有纤维状物渗出，看左右肺的大小、质地、颜色等。5.注意事项：a)剖检过程中要注意个人防护，剖检人员必须带手套，防止手划伤感染。b)如病猪已经死亡，要及时进行尸体剖检。c)剖检中要做记录，将每项检查的各种异常现象详细记录下来，以便根据异常现象做出初步诊断。（三）部分细菌学实验和病毒学病料处理1．细菌的分离培养：取病猪肺脏（冰冻组织需充分解冻），用酒精棉球点燃消毒肺脏表面，无菌手术刀切口，将接种环伸入于肺脏肺泡内，无菌划线接种TSA平板。具体操作如下：a)右手执笔式持接种环，在酒

8、精灯火焰上灼烧接种环，待冷；b)左手抓紧琼脂培养基平皿，用手掌将平皿的底固定，用手指将平皿的盖略抬起一些，进行接种。或者，将平皿盖放在试验台上，尽量直