分子生物学复习题及答案.doc

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1、一.病毒癌基因与细胞癌基因的比较？①C-onc是真核结构基因含有内含子，V-onc不含内含子。②V-onc出现碱基取代或缺失较C-onc常见，因此表达产物功能有差异。③V-onc外显子与同源的C-onc也有微小差别，V-onc表达的蛋白质有较强的细胞转化活性，C-onc的产物正调节细胞增殖。二．细胞癌基因的特点？①广泛存在于生物界，从酵母到人的细胞普遍存在。②基因序列在进化上高度保守。③C-onc是生命活动的基础，与细胞增殖分化密切相关，其表达与个体发育有关，受到严格程序调控，但并不具有致癌性。④某些物理、化学及感染性因素能能使

2、原癌基因激活。三.肾素血管紧张素对高血压的影响？肾素-血管紧张素系统（RAS）由肾素、血管紧张素原、血管紧张素转化酶、血管紧张素及其相应的受体构成。肾素激活从肝脏产生的血管紧张素原，生成血管紧张素Ⅰ，然后经肺循环的转化酶（ACE）生成血管紧张素Ⅱ。作用于血管紧张素Ⅱ受体，使小动脉平滑肌收缩，刺激肾上腺皮质球状带分泌醛固酮，通过交感神经未梢突触前膜的正反馈使去甲肾上腺素分泌增加，从而导致血压升高。六.细胞型和搔痒型的区别？细胞型（正常型prpc）和搔痒型（致病型prpsc）。两者蛋白质在一级结构完全相同，其共价键也无变化，差异在三

3、级结构。主要表现螺旋和折叠的含量不同。Prpc的α-螺旋占42%，β-折叠为3%，而prpsc的α-螺旋占30%，β-折叠增加为45%，为prpc分布于脑等组织细胞表面，而prpsc则存在于细胞内次极容酶体内。九.PBR322与PUC18/19的结构特点？①含有两个抗生素抗性基因：氨苄青霉素基因，四环素基因；具有较小分子量，容易纯化；具有较高的拷贝数；复制起始点，保证高拷贝自我复制。②来源PBR322质料复制起始点；虽含有AMPr基因，但它的核苷酸序列发生变化，不含有酶切位点；含有半乳糖苷酶基因的启动子及其编码的α-肽链DNA序

4、列，同称为LacZ基因。LacZ基因中，靠近5′端有一段多克隆位点（Mcs区段），影响其功能。十．限制性内切酶的发明者、定义、命名、切割产物及其修饰酶？①威尔挪、史密斯、内森斯。②限制性核酸内切酶（RE）是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶，简称为限制性内切酶。③第一个字母取自产生该酶的细菌属名，用大写；第二、第三个字母是该细菌的种名，用小写；第四个字母代表株；最后用罗马数字表示发现的先后次序。④切割产物：粘性未端、钝性未端。①修饰酶：未端脱氧核苷酸转移酶（TdT），碱性磷酸酶，多聚核苷酸激

5、酶（PNP），核糖核酸酶（RNase），脱氧核糖核酸酶（DNase）。十二.转化：重组载体导入原核细胞的过程。转染：重组载体导入真核细胞的过程。感染：病毒载体导入细胞的过程。十三.蓝白斑筛选法？载体PUC18/19含：β－半乳糖苷酶基因（Lacz）的调控序列及其N端的146个AA的α-肽编码区；外源DNA克隆位点MCS位于其中、并保留了α-肽的功能；转化在β－半糖苷酶基因缺失突变株、由于质粒表达的α-肽可以补充菌株缺失的α-肽、所以编码具有活性的β-半乳糖苷酶、催化半乳糖的分解。在加入β-半乳糖苷酶基因表达诱导剂－IPTG（异丙

6、基硫代β－半乳糖苷）和底物X-gal（5溴4氯3吲哚β－半乳糖苷）时、分解的产物产生蓝色菌落。称为α-互补效应。MCS插入外源DNA片断时，β－半乳糖苷酶基因失活、不能产生α－肽、即不能转录活性的β－半乳糖苷酶、在加入诱导剂和底物的平板上不再出现蓝色菌落、而是白色菌落。称为插入失活。十八.DNA印迹、RNA印迹、Pro印迹的异同？DNA印迹与RNA印迹的区别：①变性：RNA电泳前加热变性，电泳时加变性剂保持RNA处于变性状态；DNA电泳后变性②转膜：RNA转膜前不需要变性和中和处理；DNA转膜前需要碱变性和中和处理。③限制性内切

7、酶：RNA不需要内切酶切割。④靶核酸：RNA；DNA蛋白质印迹技术与DNA和RNA不同的是，蛋白质的转移只有靠电转移方可完成。另外，蛋白质的检测是以抗体做探针的，然后再与用碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶标记或同位素标记的第二抗体反应，最后用放射自显影，底物显色或底物发光来显示目的蛋白的有无和所在位置。十九.基因组文库和CDNA文库的比较？基因组文库：某种生物DNA顺序的不同的DNA片段所构建的群体，即克隆足够多基因或某种基因的总和，包括外显子和无表达功能内含子序列。步骤：①纯化真核细胞DNA，并用适当的限制酶部分消化②分离适当大小的

8、基因组片段③载体DNA，用适当的限制酶消化并分离得到载体④载体与基因组DNA片断连接⑤体外包装及感染⑥基因组文库的扩增。构成了该生物的基因组文库。CDNA文库：生物体全部mRNA经逆转录合成的CDNA序列的克隆群体。CDNA文库中的每一个克隆只含一种mRNA信息