细菌学卫生检验种类及标准.ppt

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1、第七章细菌学卫生检验种类及标准邵丽军1主要内容第一节体液、分泌物及排泄物细菌学检验第二节各种环境标本细菌学检验及卫生标准（自学）2临床感染性疾病的诊断和治疗应用良好的检测技术和方法，提供准确的结果或报告确定检查目的和方法正确规范的采集和运送标本临床检验流程第一节体液、分泌物及排泄物细菌学检验3细菌学鉴定方法1、形态结构检查2、细菌生长特性检查如菌落3、生化试验4、血清学试验5、药敏试验6、细菌毒素检测7、分子生物学检测8、噬菌体分型试验9、动物试验4临床标本常规细菌学检验程序标本选择标本采集与运送观察标本、前处理直接涂片快

2、速检验分离培养增菌培养可疑菌落血清学鉴定药物敏感试验生化反应形态观察结果报告5细菌学检验报告原则分级报告一级报告：直接涂片染色结果及培养结果二级报告：分离培养及药敏结果三级报告：细菌种属、药敏结果、结果评价和建议67无菌原则正确采样时间正确采样部位足够样本量多样性采集做好记录标本采集的一般原则8一、血液标本细菌学检验二、脑脊液标本细菌学检验三、穿刺液和引流液标本细菌学检验四、尿液标本细菌学检验五、脓液和分泌物标本细菌学检验六、痰液标本细菌学检验七、生殖道标本细菌学检验八、粪便标本细菌学检验9一、血液标本细菌学检验种类常见病原

3、菌G+球菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌G+杆菌结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌G-球菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌G-杆菌大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌真菌念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌厌氧菌拟杆菌、产气荚膜梭菌10（一）血液标本的采集与送检1.采样时间：发热期、用药之前、病情发展2.采样部位及频率：多部位、高频率例1：亚急性心内膜炎：24h内在三个不同部位采集3次血标本，两次间隔

4、不少于15分钟，如培养阴性，就再采3次血标本。例2：急性脓毒血症：在10分钟内在不同部位采2～3次血标本。113.样本采集的量：成人血量5～10ml，婴儿1ml～2ml，儿童3ml～5ml；当怀疑为真菌感染时，应采集双份量，分别作双相培养(37℃/28℃)。4.样本的送检：尽快，室温5.操作：直接采血注入含増菌肉汤的培养瓶或用不含防腐剂的肝素抗凝管至实验室接种，需同时做需氧和厌氧培养12血培养一级报告二级报告三级报告“检出***菌”，药敏试验结果；7天仍无生长现象，报告为“7天培养无细菌生长”（结核可培养8周报告阴性）13（

5、二）细菌学检验14（一）标本的采集与送检1.采样：腰椎穿刺术无菌采集脑脊液3-5ml，床边接种或放入无菌试管中，立即送检（采样到送检不超过1h）；2.注意保温，不可置冰箱保存，因为会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌；3、脑脓肿吸出物尚须检测厌氧菌和寄生虫培养基选择：普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿等。二、脑脊液标本细菌学检验15（二）细菌学检查1．涂片检查：革兰染色：查找一般细菌，尤其脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和链球菌多见。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。墨汁染色：查找新

6、型隐球菌。2．细菌培养：脑脊髓液培养多数需3～4天，在此期间如有细菌生长，经鉴定报告“××菌”，同时报告药敏试验结果。16床边接种离心涂片，同时增菌不染色镜检革兰、抗酸、墨汁染色单菌落涂片染色离心沉淀物或増菌培养物脑脊液报告单17三、穿刺液和引流液标本细菌学检验（一）标本的采集与送检1、标本来源：胸腔积液、腹水、心包积液、关节液、胆汁、鞘膜液深部组织液等2、标本量：心包积液、关节液为1-5ml，胸腔积液、腹水为5-10ml3、收集送检：无菌收集并置于无菌抗凝试管送检，无法立即送检可冷藏；标本还可床边接种或置厌氧运送培养基内送

7、检，无法立即送检可室温保存。18（二）细菌学检查1、标本处理：①浆液离心沉淀物涂片；②脓液直接涂片；③含血细胞，加等量蒸馏水破坏红细胞后，离心沉淀物涂片2、涂片检查：这类标本因原部位是无菌的，只要检出细菌即可诊断感染的类型，故直接涂片很重要。革兰染色：查找一般细菌。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。3、分离培养及鉴定：离心沉淀物分别接种增菌肉汤、血琼脂平板、中国蓝或麦康凯琼脂平板、厌氧血琼脂平板。如有细菌生长，需进一步鉴定和药敏试验后报告。19四、尿液标本细菌学检验（一）标本的采集与送检1、采集方法：防止尿液被尿道口菌群污染，采用

8、中段尿采集法、导尿法和膀胱穿刺法采集标本无菌导尿管采集尿液，在排出15ml尿液后收集，有潜在引入尿道菌的危险；留置导尿管采尿，先以75%酒精消毒导管口，用无菌注射器收集10ml；长期留置导尿管患者，应在更换新尿管时留取尿标本。202、采集时间：通常应采集早晨起床后第一次尿液，在抗菌药物应用