动物生理学-蛙心灌流实验报告.doc

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1、一、实验结果1、正常心搏曲线2、滴加0.65%NaCl溶液3、滴加2%CaCl2溶液2滴4、滴加1%KCl溶液5、滴加0.01%Adr溶液6、滴加0.01%Ach溶液二、分析与讨论1、正常心搏曲线从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱，再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点，可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病。2、滴加0.65%NaCl溶液滴加0.65%NaCl溶液后，心跳减弱，这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。3、

2、滴加2%CaCl2溶液2滴加入CaCl2后，心跳略微增强。细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。Ca2＋浓度增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。Ca2＋浓度增高使Ca2＋内流增多，心肌收缩能力增强。4、滴加1%KCl溶液滴加1％KCl后，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度也逐渐下降。这是因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低。所以心搏曲线振幅减

3、小。5、滴加0.01%Adr溶液滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大。其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强。另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强。6、滴加0.01%Ach溶液滴加乙酰胆碱后，蛙心收缩减弱，心率减慢。其

4、机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱。7、加2滴0.01%阿托品和0.01%Ach与只加乙酰胆碱相比，加了阿托品后再加乙酰胆碱的牛蛙心脏跳动无明显变化。因为阿托品能与心肌细胞膜的M胆碱受体结合，妨碍乙酰胆碱与其结合，从而起抗胆碱作用，但由于心脏本身的缘故使每次收缩的时间增加了。且在整个实验过程中，该牛蛙的心脏时不时的会停止跳动，影响实验结果。三、结论本次实验首先要制备离体蛙心，制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。其实质是：在心室收缩时，心室容积减少

5、，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增大，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降。但是有时候蛙心插管内液面波动不明显，其主要原因有：(1)插管内尖端出现血凝块。此时应用接有针筒的长吸管将血凝块吸出，并将新鲜的任氏液注入，直至血液颜色变浅；(2)插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等地方。解决方法为将插管重新插入心室；(3)插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁。解决方法为将插管稍稍外提，使插管口正好处于心室腔内，且开口正对着液体喷射方向。细胞外液高Ca2+，促进Ca2

6、+内流，胞浆Ca2+浓度升高，Ca2+与肌钙蛋白的结合数量增加，心肌收缩力增加，当胞浆Ca2+浓度持续升高时，Ca2+与肌钙蛋白结合后不解离，心肌处于持续收缩状态而形成钙僵；肾上腺素促进Ca2+内流，提高肌浆中Ca2+的浓度，增加心肌收缩力，肾上腺素又可促进Ca2+泵活动，降低肌浆中Ca2+浓度，促进Ca2+与肌钙蛋白的解离，使心肌舒张完全4．1％KCl：细胞外K↑――K与Ca在细胞膜上有竞争性抑制――K抑制细胞膜对Ca转运――进入细胞内Ca↓――心肌的兴奋收缩联过程减弱――心肌收缩力↓[K]↑――膜内外k浓度梯度减小――静息电位绝对值

7、减小――兴奋性↑↓[K]↑――Ca内流受抑制――0期去极速度和幅度降低――传导性降低5．2％CaCl2：即180mmol/L（正常：2mmol／L）细胞膜外Na与Ca有竞争性抑制细胞外液Ca浓度↑――细胞兴奋时内流Ca↑――心肌收缩力↑6．O.65％NaCl：111mmol／L细胞外Ca↓――2期内流Ca↓――胞浆Ca浓度↓――心肌收缩↓7：肾上腺素正性变化肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合――心肌细胞和肌浆网膜Ca通透性↑――肌浆中Ca浓度增加――心肌收缩↑8：乙酰胆碱负性变化乙酰胆碱可直接抑制Ca通道――Ca内流↓――心肌收缩↓0

8、期：心室肌细胞兴奋时，膜内电位由静息状态时的-90mV上升到+30mV左右，构成了动作电位的上升支，称为除极过程（0期）。它主要由Na+内流形成。1期：在复极初期，心室肌细胞内电位由+30mV迅速下降到0m