选修1知识点归纳.doc

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1、【选修一】复习归纳一、培养基的成分:1、培养基概念:给生物(植物、动物组织或细胞、细菌、真菌和病毒)的生长繁殖提供营养的液体或固体。2、微生物的培养基:营养成分包括①碳源(供碳元素的有机物或无机物)、②氮源(供氮元素的有机物或无机物)、③水、④无机盐、⑤生长因子(指有些微生物自身不能合成,而生长必需的一类微量的小分子有机物)二、微生物培养基的制作过程:①根据培养对象的类型确定配方②称量并装入三角瓶中③调节好PH值④灭菌⑤600C三角瓶中培养基倒入培养皿中凝固成平板,或倒入试管中搁置斜面。三、常见培养基的配方(选修1+选修3)1、细菌培养基:(1)

2、成分:蛋白胨+酵母提取液+NaCl+水(一般要求中性偏碱的环境)(2)类型:①LB固体培养基(加琼脂或琼脂糖)a、培养皿中固体平板培养基:用于划线分离或稀释涂布分离微生物。b、试管固体斜面培养基:用于保存菌种)②LB液体培养基(不含琼脂):常用于菌种的扩增繁殖或工业生产。③分离含脲酶的微生物培养基:尿素、葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红(作为指示剂)、琼脂糖(不含氮)、水(要点:只能以尿素作为唯一的氮源)2、真菌培养基:蔗糖+豆芽汁+无机盐(一般要求中性偏酸的环境)。若要培养酵母菌,则可只要葡萄糖溶液即可3、生产果酒:(1)苹果果酒:苹果汁、蔗

3、糖(加入蔗糖的目的有:①有利于酵母菌的繁殖②能提高果酒的酒精浓度)(2)若生产葡萄酒:葡萄、蔗糖(无氧,并排出气泡CO2)4、生产果醋:果酒、水(醋杆菌吸附在锯末上、通入空气、测PH)5、生产泡菜:多种蔬菜均可、调味品、食糖、盐6、植物组织培养的培养基(MS培养基):水分、大量元素、微量元素、有机成分(如蔗糖、甘氨酸、肌醇等)。注意:①蔗糖:作为营养并维持渗透压②此时无植物激素和琼脂。(1)MS发芽培养基:MS培养基+BA溶液(多)+NAA溶液(少)+蔗糖+琼脂(2)MS生根培养基:MS培养基+NAA溶液+蔗糖+琼脂(注意:此时不加入BA溶液是因

4、为生根时所需的细胞分裂素少,丛状苗本身可产生少量的细胞分裂素)【说明:BA(苄基腺嘌呤)是细胞分裂素类似物,NAA(萘乙酸)是生长素类似物。】(3)若在摇床上形成胚性细胞或通过培养特定植物细胞系生产次生代谢产物,则需用液体培养基)7、植物(幼苗)无土栽培:适宜浓度完全培养液(含植物生长必需的大量元素和微量元素)8、动物细胞培养液:成分类似动物细胞外液,包括水分、无机盐、葡萄糖、胎牛血清、滋养细胞(失去增殖能力的成纤维细胞)支持生长,胰岛素刺激,二氧化碳(维持PH值)恒温培养箱。通常加入抗生素用来抑制微生物生长。9、动物胚胎体外培养:配制一系列含有

5、不同成分的培养液,用以培养不同发育时期的胚胎。只能对哺乳动物早期胚胎培养,比组织培养、细胞培养更困难。10、动物胚胎干细胞培养:培养皿底部要加饲养层细胞来抑制胚胎干细胞的分化,促进胚胎干细胞的分裂。饲养层细胞一般是胚胎成纤维细胞。四、微生物的无菌操作要领:(1)培养基要灭菌(高压蒸汽灭菌)(2)所用的器皿要灭菌(3)操作环境(超净台)和双手要消毒(4)菌种转移要在超净台中酒精灯的火焰旁进行(5)实验结束时,培养用过的培养基一定要经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉。五、几种消毒或灭菌的方法:1、一般的培养基(耐高温)、器皿:高压蒸汽灭菌(1210C、1Kg

6、/cm2、15min)2、培养基中含葡萄糖:为了防止葡萄糖分解碳化,要用500g/cm2、900C、30min。3、尿素固体培养基:培养基经1210C下灭菌后,冷却至600C时,再将尿素溶液通过G6玻璃漏斗过滤加入。G6玻璃砂漏斗过滤在使用前也要在1210C下用纸包好灭菌。4、超净台灭菌:打开紫外灯和过滤风,灭菌30min。5、双手用70%酒精擦拭消毒。6、无菌空气可以用通气管中塞上脱脂棉通入。7、制果酒的葡萄:用高锰酸钾溶液消毒8、植物组织培养时的外植体消毒:先在70%乙醇中浸泡30秒,再放入5%次氯酸钠中浸泡5分钟,然后用另一5%次氯酸钠溶液

7、浸泡5分钟,最后在超净台中用无菌水清洗。若外植体是取自进行过无菌培养的幼苗,则外植体不需要上述的消毒过程。9、接种环灭菌:在酒精灯外焰处灼烧10、涂布器(即玻璃刮刀)灭菌:保存在70%乙醇中,使用时放在酒精灯火焰上,等到刮刀上的火焰熄灭。六、微生物的分离和计数问题:1、划线分离法(1)优点:操作方法简单(2)不足:菌落不容易分开,分离效果较差。(3)要领:①划线前都要灼烧接种环灭菌(第一次灭菌是为了消灭接种环上原有的微生物、后面在每一区划线之前灼烧是为了保证接种的菌种只能来自前一次划线的末端。②划线的第一区与最后一区不能相连。(4)说明:此方法不

8、能用于计数。2、稀释涂布分离法:(1)优点:单菌落更易分开,且可用于对微生物间接计数(2)不足:操作复杂(3)要领:①将菌液稀释(10-

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