SOP-YQ010aLC20AT岛津高效液相色谱仪使用及维护保养操作规程.doc

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1、1.目的PURPOSE建立SPD-20A岛津高效液相色谱仪使用及维护保养操作规程，使设备的使用及维护保养管理规范化、制度化。2.责任RESPONSIBILITY质量部QC负责本文件的编写，QC主管审核，质量部经理批准。QC负责仪器的使用及维护管理，QA负责监督执行。3.适用范围SCOPE适用于公司所有SPD-20A岛津高效液相色谱仪操作及维护保养。4.内容CONTENT4.1流动相的处理4.1.1过滤溶剂：溶剂在使用前一定要用0.45μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。本实验室有水溶性和脂溶性两

2、过滤膜供选择（反光面朝上），缓冲盐先用水膜过滤，和有机相混合后再用有机滤膜过滤，滤前先滤少量纯化水清洗滤器。4.1.2保持储液瓶的清洁：用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃清洗瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。4.1.3保证溶剂的质量：一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。4.1.4使用前故障及解决方法4.1.4.1流动相脱气不充分：流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。可使用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用有效的脱气方法或两种方法配

3、合使用；改系统内混合为系统外预混合。4.1.4.2流动相供给不畅：4.1.4.2.1流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。输液管上装溶剂滤头，既可使输液管沉至瓶底，又可过滤流动相，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。4.1.4.2.2溶剂滤头阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。溶剂滤头被微粒所阻塞或长霉，去掉溶剂滤头后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的溶剂滤头则可。有时候换上新的溶剂滤头仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的溶剂滤头。不管如何，流动相都需要重新过滤。4.1.

4、4.2.3流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于溶剂滤头孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。如果流速大于10ml/min，常会出现这种现象。使用下列方法解决：（1）使用低流速；（2）换大孔径的溶剂滤头；（3）增加进液管道内径；（4）抬高或加压储液器；（5）不用溶剂滤头，但流动相一定要先过滤；（6）储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。应松开盖子或留有1mm的缝隙；（7）进液管道阻塞或弯曲使泵抽不到液，注意调整进液管道或更换新的。其它问题包括渗漏或接头松动、泵部件损坏等，都能引起供液不正常。1.1.1流动相和储液器被污染：由于污染，噪音越来越大，检测器基线

5、上升。污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出多余的峰。用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一个大的伪峰。有时基线噪音突然增大或突然提高，都是因为反复加进新的流动相或系统用得太久（通宵）所造成的。新加进的流动相有污染物或者流动相长霉，繁殖了细菌。脏的储液器会污染清洁的流动相。每种流动相备有专用的储液器，或者定期报废储液器。已经污染的流动相一定要废弃掉。1.2仪器组成及电源1.2.1仪器组成：本系统由LC-20AT型高压双泵；SPD-20A型紫外检测器；7725i进样器；CO-Ⅳ柱温箱；色谱数据处理系

6、统（N2000）；计算机；打印机。1.2.2电源：接通外电源及稳压器电源，依次打开泵、检测器、柱温箱，色谱数据处理系统，计算机的电源开关。1.3准备1.3.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜），超声脱气10min以上待用。根据待检样品的需要选用合适的色谱柱（柱进出口方向应与流动相流向一致）和定量环。配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm的样品过滤器过滤后待用。1.3.2检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。1.3.3注意：真空抽滤装置和超声波装置为液相色谱实

7、验室必须的辅助设备。1.4高压输液泵的操作1.4.1开机和平衡系统：先把吸滤头放入甲醇水（10：90）或流动相瓶中，如果使用的流动相为缓冲盐溶液，应先用纯水冲洗10分钟左右再使用流动相，以免盐析出损坏系统。打开排液阀（将泵上部的黑色旋钮逆旋转90～180度），按purge键排液2～3分钟，purge完毕后关闭排液阀，按pump键，泵启动，指示灯亮，按func键调流速（流速由低到高慢慢升至1.0ml/min），如有柱温条件可同时开启柱温箱，平衡系统，此时可以同时进行手动进样器的清洗，手动进样器