生物分离工程的特点.doc

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1、1、生物分离工程的特点;①成分复杂,固液分离困难;②浓度低,分离能耗大③收率低;④易失活;⑤不稳定性。2、精制产品分离纯化一般流程1.胞外产品:发酵液→预处理→目的产物尽量进液相→→固液分离→收集液相后→提取与精制2.胞内产品:发酵液→预处理→除杂、改变液相性质→固-液分离→收集细胞或菌体→细胞破碎→目的产物进液相→固-液分离→收集液相→后提取与精制3、生物悬浮液的特性:①悬浮物颗粒小,比重与液相相差不大;②固体粒子可压缩性大;③粘度大,含有蛋白质、多糖等胶体物质,大多为非牛顿型流体。改性的目的:降低滤饼比阻,提高过滤与分离

2、的速率。4、凝聚:指在电解质作用下,由于胶粒间双电层排斥电位的降低,而使胶体体系不稳定的现象。凝聚作用机理:加入电解质→电解质中的高价阳离子→对胶体周围离子的影响→双电层电位↓→胶体稳定性↓→发生凝聚5、阳离子对带负电荷的发酵液胶体粒子凝聚能力的次序为:Al3+>Fe3+>H+>Ca2+>Mg2+>K+>Na+>Li+6、絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,基于桥架作用,使胶粒形成较大絮凝团的过程。7、错流过滤(Cross-FlowFiltration)又称切向流过滤,是一种维持恒压下高速过滤的技术。其操作特点是使悬浮液在过滤

3、介质表面作切向流动,利用流动的剪切作用将过滤介质表面的固体(滤饼)移走。8、珠磨法细胞破碎率可用一级反应动力学表示:间歇操作:ln[1/(1-R)]=Kt连续操作:ln[1/(1-R)]=Kτ其中τ=V/F式中:R—破碎率(g/g)K—反应速率常数(1/s)t—破碎时间(s)τ—平均停留时间(s)V—破碎室悬浮液体积(L)F—进料速率(L/s)9、高压匀浆法破碎的动力学方程KT—与温度等有关的破碎常数。N—悬浮液通过匀浆器的次数。P—操作压力。a—微生物种类常数,对于酵母菌a值可取2.210、简述采用多种破碎方法相结合提高破

4、碎率的原理化学法与酶法取决于细胞壁膜的化学组成,机械法取决于细胞结构的机械强度,而化学组成又决定了结构的机械强度,组成的变化必然影响到强度的差异,这就是化学法与机械法相结合的原理。11.沉淀的作用一是浓缩,通过沉淀目的产物由液相变成固相,浓缩倍数可达几十倍至数百倍;二是纯化,通过沉淀固液分相后,除去留在液相(如果目的产物是固相)或沉积在固相中(目的产物留在液相)的杂质。12、盐析法具有如下特点:(1)成本低,不需要什么特别昂贵的设备;(2)操作简单、安全;(3)对许多生物活性物质具有稳定作用。(4)存在产品与杂质的共沉作用,

5、因而它只能作为初步纯化。13、盐析原理。蛋白质在高盐浓度下发生盐析,这是因为当中性盐浓度增加至一定程度时,蛋白质表面电荷被大量中和(亲水基团被大量中性盐离子所包围),水分子离开蛋白质的周围,暴露出疏水区域,疏水区域间的相互作用,使蛋白质分子相互聚集而沉淀。14、Cohn方程式S—蛋白质的溶解度(g/L)I—离子强度mi—i离子的摩尔浓度(mol/L)Zi—i离子所带的电荷数(即离子的价数)β—盐析常数,与盐的种类无关KS—盐析常数,与温度和pH无关15、KS与盐种类的关系对于阴离子,含高价阴离子的盐,效果比低价的好。常用阴离

6、子的盐析效果排列如下:柠檬酸盐>PO43->SO42->CH3COO->Cl->NO3->SCN-。对于阳离子,一般地高价阳离子(如Mg2+、Ca2+)不如低价阳离子,常用一价阳离子的盐析效果排列如下:NH4+>K+>Na+。而常用盐析剂盐析效果的排列顺序为:NaH2PO4>(NH4)2SO4>Na2SO4>MgSO4>NaCl16、有机溶剂法沉淀原理一般水溶液加入有机溶剂水溶液的介电常数↓→溶质分子(蛋白质)之间静电引力↑→溶质的溶解度↓。有机溶剂沉淀法具有如下特点:①不同溶质的沉淀所要求的有机溶剂浓度不同,这是有机溶剂分

7、步沉淀的基础。其分辨能力比盐析法高。②溶剂容易蒸发除去,因此适合于制备食品用蛋白质。③有机溶剂密度低,与沉淀物密度差大,过滤和离心分离都较容易。④容易使某些生物大分子变性失活。⑤有机溶剂易燃易爆,操作常需在低温下进行。17、非离子多聚物沉淀法原理.沉淀作用是多聚物与大分子发生共沉作用的结果。与有机溶剂相似,使大分子的水化度降低,促使大分子沉淀多聚物与大分子之间以氢键相结合形成复合物.PEG沉淀法特点(1)操作条件温和,变性失活少。(2)具有极高的沉淀效果,用量较少,PEG浓度一般为10%左右。(3)沉淀后多聚物较易除去,对后

8、继分离影响较小。18、膜分离技术的特点1)处理效率高,设备易放大;(2)适合于热敏物质分离;(3)失活较少;(4)无相变过程,省能;(5)在分离、浓缩的同时可达到部分纯化;(6)可达较高回收率;(7)系统可密闭,避免外来污染;(8)不外加化学物质,减少环境污染;(9)不适合于分子量相近物质

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