几种常用的染色方法

几种常用的染色方法

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时间:2017-12-28

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1、几种常用的染色方法一、美兰染色法在已染色、固定好的抹片上,滴加适量的(足够覆盖涂抹点即可)美兰染色掖,经1—2分钟,水洗,干燥(可用吸水纸吸干,或自然干燥,但不能烤干),镜检。二、革兰氏染色法1、在已干燥、固定好的抹片上,滴加草酸铵结晶紫染色掖,经1—2分钟,水洗。2、加革兰氏碘溶液于抹片上媒染,作用1—3分钟,水洗。3、加95%酒精于抹片上脱色,约30秒至1分钟,水洗。4、加稀释石炭酸复红(或沙黄水溶液)复染10—30秒,水洗。5、吸干或自然干燥,镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。三、抗酸染

2、色法1、萋—尼氏抗酸染色法:首先在已干燥、固定好的抹片上,滴加较多量的石炭酸复红染色液,在玻片下以酒精灯火焰微微加热至发生蒸气为度(不要煮沸),维持微微发生蒸气,经3—5分钟,水洗。然后用3%盐酸酒精脱色,至标本无色脱出为止,充分水洗。再用碱性美兰染色液复染约1分钟,水洗。最后吸干,镜检。抗酸性细菌呈红色,非抗酸性细菌呈蓝色。2、又法之一:滴加石炭酸复红液于抹片(在已干燥固定过的)上染1分钟,水洗;再用1%美蓝酒精溶液复染20秒,水洗,干燥,镜检。抗酸菌红色。镜检前对光检查染色片,标本片务必全呈蓝色,如标本

3、片呈现红色或棕色,表示复染不足,应在作复染5—10秒,再观察,如仍未全呈蓝色时,仍可反复复染,至符合要求为止。四、瑞特氏染色法1、抹片自然干燥后,滴加瑞特氏染色液于其上,为了避免很快变干,染色液可多加些,或者看情况补充滴加;经1—3分钟,再加约与染液等量的中性蒸馏水或缓冲液,轻轻晃动玻片,使与染液混匀,经5分钟左右,直接用水冲洗(不可先将染液倾去),吸干或烘干,镜检。细菌染成蓝色,组织、细胞等物呈其他颜色。2、另一染色法:抹片自然干燥后,按涂抹点大小,盖上一块略大的清洁滤纸片,在其上轻轻滴加染色液,至略浸过

4、滤纸,并看情况补滴,维持不使变干;染色3—5分钟,直接以水冲洗,吸干或烘干,镜检。此法的染色液经滤纸滤过,可大大避免沉渣粘附抹片上而影响镜检观察。五、姬母萨氏染色法1、于5毫升新煮过的中性蒸馏水中滴加5—10滴姬母萨氏染色液原液,即稀释成为常用的姬母萨氏染色液。2、抹片经甲醇固定并干燥后,在其上滴加足量染色液或将抹片浸入盛有染色液的染色缸中,染色30分钟,或者染色数小时至24小时,取出水洗,吸干或烘干,镜检。细菌呈蓝青色,组织、细胞等呈其他颜色,视野常呈红色。注:在进行各种染色时都应注意,当抹片滴上染色液后

5、,不可直接将剩余染液倾去,应用水连染液一起冲洗去,然后进行下一步骤,以免发生沉渣粘附,影响染色效果。

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