第七章 体外抗原抗体反应概述.ppt

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1、第七章体外抗原抗原反应概述抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体的特异性结合反应体内杀菌、溶菌、调理、中和毒素免疫病理损伤—超敏反应、免疫性疾病等体外：凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素、补体结合等第一节抗原抗体反应的原理抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力（只能在极短距离内才能发生效应）。抗原抗体结合反应的条件：①抗原与抗体间的特定部位的空间结构必须相互吻合，具有互补性（先决条件）;②抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有足够的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。不形成牢固的共价键，通过非共价键结合这种弱的结

2、合力涉及几种分子间的作用力一、抗原抗体的结合力1、静电引力2、范德华引力3、氢键4、疏水作用力1、静电引力概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力。又称库伦引力。静电引力的大小与两个相互作用基团间的距离的平方成反比。二、范德华引力概念：抗原和抗体相互接近时，各自所携带的原子与原子、分子与分子由于分子极化作用而出现的引力。结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比。作用力最小作用大小取决于二者分子空间构型的互补性概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。三、氢键结合力供氢体：－COOH、－NH2和－

3、OH受氢体：氧、氮氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比。最具特异性（必须供氢体和受氢体互补才能实现氢键的结合）四、疏水作用力（疏水键）概念：两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由于对水分子排斥而趋向聚集的力。抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间正、负极性消失，亲水层立即失去。结合力最强，约占总结合力的50％。静电引力：异性相吸（electrostaticforces）范德华引力:作用最小（vanderWaalsinteractions）氢键:最具特异性（hydrogenbond）疏水作用力:作用最大（hydrophobicinteractions）

4、抗原抗体结合力示意图抗原抗体结合力结合力的大小亲和力（affinity）表示亲合力（avidity）二、抗原抗体的亲和力和亲合力亲和力（affinity）：是抗体分子上一个抗原结合点与相应的抗原决定簇之间的相适应而结合的强度，是抗原与抗体间固有的结合力。亲和常数（K）：K值越大⇨抗体的亲和力越高⇨与抗原结合越牢固抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其亲合力（avidity）：是指一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关。另外也与亲和力强弱有关。与抗体的结合价直接相关。亲合力高，与抗原结合牢固不易解离。亲水胶体疏水胶体转化NaCl可见反应血

5、清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体。当抗原与抗体结合使表面电荷减少，水化层变薄，失去亲水性能，抗原抗体复合物成为疏水胶体在电解质作用下，中和胶体粒子表面的电荷，使各疏水胶体之间靠拢，形成可见的抗原抗体复合物三、亲水胶体转化为疏水胶体第二节抗原抗体反应的特点1.特异性2.比例性3.可逆性4.阶段性一、特异性（specificity）1、概念：一种抗原分子通常只能与其刺激机体后产生的抗体结合，这种抗原与抗体结合反应的专一性称为特异性。特异性示意图2、决定因素：由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。3

6、、应用：由于抗原抗体反应具有高度特异性，故可用已知的抗原（抗体）来检测相应未知的抗体（或抗原）。概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。4、交叉反应（crossreactions）抗原抗体交叉反应示意图B三、比例性（proportionality）1、比例性是指抗原与抗体发生可见反应遵循一定的量比关系。2、以絮状沉淀实验为例，受抗原抗体比例性的影响非常明显。3、根据所形成的沉淀物及抗原抗体比例关系绘制反应曲线。网格学说（图）抗体的两个Fab段分别结合两个Ag分子，相互交叉结合连接成巨大的网格状立体聚合物，（可见）

7、。二者比例合适：Ab/Ag过剩过剩方的结合价得不到饱和，大多数游离存在，只形成小分子复合物（不可见）。最适比(optimalratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，几乎无游离抗原或抗体的抗原抗体浓度比。等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原与抗体分子比例合适的范围。带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原的现象。前带(prozone)抗体过量时称为。后代(postzone）抗原过量时称为。5、一组概念带现象包括在抗原抗体反应中，抗体（或抗原）与一定量的对应物结合出现可见反应所需的最小

8、量称为效价（或滴度），一般以最高稀释倍