食品化验员微生物检测知识培训ppt课件.ppt

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1、检验员基础知识培训微生物(microorganism，microbe)是一群个体微小、结构简单的低等生物的统称。通常人的肉眼看不见，必须借助于光学显微镜或电子显微镜才能看到。概念原核微生物微生物的分类非细胞型真核微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖，病毒属于此类微生物。细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂，如真菌、藻类细胞分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜,包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。微生物的主要特点“短”——个体微小：＜0.1mm，需借助显微镜观察“平”——构造简单：单细

2、胞，简单多细胞或非细胞“快”——繁殖快速：20分钟一代，一天内1个10亿“多”——各类多样：细菌、真菌、病毒、原生动物“广”——分布广泛：土壤、空气、水和极端环境中细菌细菌的群体形态在固体培养基上（内）的群体形态——菌落单个或少数的细胞在固体培养基上（内）会形成的以母细胞为中心的一堆肉眼可见的，有一定形态、构造特征的子细胞集合。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。单位:CFU任务一:微生物培养基任务分析一、检测意义培养基是供微生物、动植物组织生长和维持用的人工配制的养料。要制作培养基，就需要了解微生物的营养物质吸收方

3、式以及常用的培养基配制技术。二、检测方法GBT4789.28-2003食品微生物学检验染色法、培养基和试剂学习目标知识目标1、微生物生长所需要的基本营养及运输方式。2、培养基的概念、分类及配制原则技能目标1、正确进行培养基的分装和无菌检验2、正确配制实验室常用培养基相关知识一、微生物的营养1.微生物的细胞化学构成微生物细胞水（70%-90%）干物质无机物（盐）有机物蛋白质、多糖、脂、核酸、维生素、有机酸等及其降解产物微生物的营养构成微生物的营养物质按照在机体的生理作用不同可分为：碳源、氮源、能源、无机盐、水和生长因子微生物、动物、植物之间存在营养上的统一性二、培养基的定义培养基

4、提供微生物生长繁殖和生物合成名种代谢产物所需要的、按一定比例配制的多种营养物质的混合物，提供微生物所需能量，包括碳源、氮源、无机元素、生长因子及水、氧气等三、培养基的分类(1)按成分分类天然培养基合成培养基复合（半合成）培养基（2）按物理状态分类半固体培养基液体培养基固体培养基任务二:消毒与灭菌技术任务分析一、检测意义在进行微生物检验前，可以通过消毒和灭菌技术，不同程度的将实验物品和实验环境中的微生物减少甚至完全杀灭，从而减少或消除外来微生物对试验结果的影响，生物检测结果的真实性和准确性二、检测方法（1）加热灭菌干热灭菌湿热灭菌（2)辐射灭菌—紫外线灭菌干热灭菌法原理：干热灭菌是

5、在电热干燥箱内利用高温干燥空气（160℃~170℃）进行灭菌，它是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。此法适用于玻璃器皿如移液管、试管和培养皿的灭菌。培养基、橡胶制品、塑料制品不能采用干热灭菌。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固越慢。干热灭菌所需温度要高，时间长1-2h，但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的报纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。干热灭菌法1、将培养皿、吸管等下班器皿洗净干燥后，用旧报纸包好，或装入特制的铁筒中2将包装好的玻璃仪器摆入烤箱中，彼此间留有一定

6、的空隙以便流通空气。3、关紧箱门，接上电源4、设定温度。灭菌温度一般在160℃-170℃保持1-2个小时5、待自然降温冷却后才能开门取出玻璃器皿，避免由于温度突然下降引起玻璃器皿碎裂。湿热灭菌法高压蒸气灭菌法主要是指将物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气，待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大。因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时湿热

7、的穿透力强，可增加灭菌效力。讨论：干热灭菌法和湿热灭菌法哪个杀菌效力大?湿热灭菌法一般培养基用0.1MPa，121.5℃，15—30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度及维持时间随灭菌物品的性质和容量等具体性况而有所改变。打开锅盖加水放入待灭菌的物品密封设定温度时间通电加热灭菌断电开盖紫外线灭菌法紫外线灭菌是用紫外灯进行的，波长为200-300nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌能力最强，它的杀菌效率与杀菌时间是成正比的，它的原理主要是抑制了DNA的复制，另一方面，