高压蒸汽灭菌器ppt课件.ppt

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1、第一节微生物的分离和培养苏教版选修1微生物培养基的配制和灭菌微生物培养基的配制和灭菌目的要求实验材料实验程序目的要求了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。实验材料药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O等。高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌灯。其它：天平、牛角匙、电炉、2MHCl、2MNaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒

2、、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、吸管、各种包装纸、防水纸、绳索、棉花、标签等。实验程序培养基的配制分离培养微生物常用器皿的准备培养基和玻璃器材的灭菌方法实验程序1:培养基的配制培养基培养基的配制原则培养基的种类培养基的配制方法和步骤培养基的配方及配制无菌水的制备培养基是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。它是进行科学研究，发酵生产微生物制品等的基础。培养基的配制原则一、营养成分二、PH值三、渗透压四、氧化还原电位一、营养成分1.根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基，如自

3、养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物质组成。异养做生物的培养基至少需要含有一种有机物质。按微生物的主要类群来说，又有细菌、放线菌、酵母菌和霉菌之分。它们所需要的培养基成分也不同，分别称为牛肉膏蛋白胨培养基，高氏1号合成培养基，麦芽汁培养基，查氏合成培养基。培养基的配制原则碳源（carbonsource）凡是提供微生物营养所需的碳元素（碳架）的营养源，称为碳源。碳源物质的功能：构成细胞物质；为机体提供整个生理活动所需要的能量（异养微生物）。微生物的碳源谱无机含碳化合物：如CO2和碳酸盐等。有机含碳化合物：糖与糖的衍生物、脂类、醇类。有

4、机酸、烃类、芳香族化合物以及各种含氮的化合物。培养基的配制原则氮源(nitrogensource)凡是提供微生物营养所需的氮元素的营养源，称为氮源。氮源物质的主要作用是合成细胞物质中含氮物质，少数自养细菌能利用铵盐、硝酸盐作为机体生长的氮源与能源，某些厌氧细菌在厌氧与糖类物质缺乏的条件下，也可以利用氨基酸作为能源物质。实验室常用的无机氮源有碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。生产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。培养基的配制原则能源指能为微生物的生命活动提供最初能

5、量来源的营养物或辐射能。微生物的能源谱：有机物：化能异养微生物的能源（同碳源）化学物质能源谱：无机物：化能自养微生物的能源（不同于碳源）辐射能：光能自养和光能异养微生物的能源培养基的配制原则化能自养微生物的能源物质都是一些还原态的无机物质，例如：NH4+、NO2-、S、H2S、H2、Fe2+等，能利用这些物质作为能源的全部是细菌，如：硝酸细菌、亚硝酸菌、硫化细菌、硫细菌、铁细菌、硫细菌、氢细菌和铁细菌等。这些无机养料常常是双功能的（如：NH4+既是硝酸细菌的能源，又是它的氮源。）有机营养物常有双功能或三功能作用，既是异养微生物的能源，又是它们的碳

6、源或氮源。辐射能是单功能的，只为光能微生物提供能源。培养基的配制原则2.注意各种营养物质的浓度与配比营养物的浓度：在一般情况下，浓度合适的营养物质才对微生物表现出良好作用，浓度大时对微生物生长起抑制作用，浓度小时不能满足微生物生长的需要。各营养物质之间的浓度比：培养基中各营养物质之间的浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和（或）代谢产物的形成与积累，尤其是碳氮比（C／N）（碳氮比一般指培养基中元素碳与元素氮的比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白两种成分含量之比）的影响更为明显。培养基的配制原则二.控制培养基的PH值各类微生物生长的最适pH各不相同，细

7、菌与放线菌生长的pH在7—7.5之间，酵母菌与霉菌生长的pH值在4-5之间。在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，常会改变培养基的pH值，为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方式：内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。外源调节：按实际需要流加酸或碱液培养基的配制原则三、渗透压注意营养物质要有适合的浓度，不能太低满足不了生长的需要，太高则渗透压太大，也会抑制微生物的生长培养基的配制原则四、氧化还原电位氧化还原电位越高，培养基的氧化活动越强，在厌氧菌培养中，加入还原剂，可降低

8、自由氧的毒害。培养基的配制原则培养基的种类据组成成分可分为:1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成2.半合成培养基：有一部分