光度计培训资料.doc

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1、光度计培训资料一.用途测量物质（指混合物）中各组分的浓度和含量。二.原理和定义光度计是建立在物质在光的激发下，物质中的原子和分子所含的能量以多种方法与光相互作用而产生对光的吸收效应。简单的说，就是某一物质对特定波长的光具有吸收特性。物质对光的吸收有选择性，各种不同的物质都有其各自的吸光带。它是根据相对测量原理工作的。在一定范围内，符合朗伯-比耳定律。T=I/I0A=-lgI/I0=KCLI0IL波长区域（对光度计）：紫外光可见光（近）红外光紫蓝青绿黄橙赤190nm330nm550nm1000nm三.应用范围广泛的应用于医学卫生、临

2、床检验、生物化学、石油化工、食品工业、制药工业、环境保护等行业和部门，是实验室常用的分析仪器。主要测量的是无机物，以测量透明的液体为主，还可用于固体（眼镜镜片）和气体（甲醛）的测量。四.特点1.光度法的精密度和准确度比较高2.测量的含量范围宽3.光度法比较成熟，可测元素较多，灵活性较强4.简单、快速、经济5.五.光度计种类1.比色计：指使用滤色片分光的光度计，如581型比色计。2.分光光度计：指使用单色器分光的光度计，又分为以下种类l可见分光光度计：330~1000nm，俗称可见光度计l紫外可见分光光度计：190~1000nm，俗

3、称紫外光度计l红外（近红外）分光光度计：1000~4000nm，俗称红外光度计l原子吸收分光光度计：通过将样品燃烧（既原子化）后来测量金属和极少数的半金属、非金属物质，测量波长在190~900nm，属原子吸收光谱。l荧光分光光度计：测量具荧光特性的物质l原子荧光分光光度计：通过某种手段将样品原子化后利用其荧光特性来测量物质含量的分光光度计。1.火焰光度计：样品通过燃烧利用滤色片分光，属发射光谱，测量钾、钠、锂元素的含量。一.仪器结构光源单色器样品室接收器放大器显示光源：钨灯（也叫卤钨灯等，负责发出可见区波长的光）、氘灯（负责发出紫

4、外区波长的光）。单色器：从钨灯、氘灯发出的全波长光中分出某一特定波长的光（分光器件为棱镜或光栅）。样品室：手动比色皿架、自动比色皿架、恒温比色皿架、流动比色皿架等。接收器：将光信号转变为电信号（有光电管、光电池或叫硅光电池、硅光二极管、倍增管、二极管阵列）。放大器：将极小的电信号放大。显示和输出：将电信号显示为可读数值或输出到电脑、打印等设备。注：单色器中的狭缝（既产品指标中的带宽），从某种意义上来说决定了仪器的挡次，狭缝越小仪器档次越高。二.可见和紫外光度计分类及型号说明1.分类l根据工作波长可分为可见分光光度计和紫外可见分光光

5、度计。l根据光路结构可分为单光束、双光束和准双光束产品。双光束产品比单光束更容易稳定，但能量低。l根据产品功能可分为扫描型和非扫描型。扫描功能用来对未知测量波长的物质进行全波长或部分波长扫描以确定其测试波长。一般只有具扫描功能的产品才会有自动走波长的功能（比手动波长方便，精度更高），我公司除721和722之外的所有产品（即便是不含扫描功能的产品）都有自动走波长功能。镨钕滤光片扫描图谱镨钕滤光片各吸收点波长值：402.4、431.4、473.0、513.5、529.7、572.8、585.6、684.9、740.1、807.5nm1

6、.型号说明（本公司）UV756PCabcdea：VIS表示可见，UV表示紫外，一般可以不标注。b：7表示分光光度计。c：2表示可见，5表示紫外。d：数字表示产品档次和先后顺序。e：表示产品的功能、配置或改进。PC表示具有扫描功能，并含扫描软件。其它的如N和S不具表示功能，只是根据市场需要的标注。二.使用方法1.标准工作曲线法通过测量1~n个标样（已知浓度）的吸光度值来建立出一条标准工作曲线，可以是一次（直线）、二次（曲线）甚至三次（抛物线）工作曲线，再利用分光光度计测得的样品（未知浓度）吸光度值通过标准工作曲线来求得浓度值（或百分

7、比值）。标样号浓度吸光度S000S120.2S240.4S360.6标准工作曲线图S0S3S1S100.10.20.30.40.50.60.701234567浓度吸光度2.浓度系数法（浓度因子）标准工作曲线法得出的工作曲线可用一个方程式表示：C=KX+B其中C指待测样品的浓度K指浓度系数（既浓度因子），靠标准工作曲线法（一次）求得。X指待测样品的吸光度。B指截距，样品浓度为0时所对应的吸光度值，B可以为正值、负值和0。此方法是通过仪器输如K和B值（不需再用标样建立出标准工作曲线），并利用以上方程式来直接测量样品的浓度。1.单点法（

8、浓度直读）利用简化的工作曲线（一次）方程式既C=KX，通过标注一个大浓度标样的浓度值来直接测量样品的浓度，简单来说就是对比法。2.注意事项l对于吸光度小（浓度小）的样品，可以通过改用大尺寸比色皿或增加固定吸光度值的率光片来解决。l一般用户测量大浓度