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1、第二章血液一般检查临床检验教研室李新岳重点:掌握白细胞计数、红细胞计数、白细胞分类计数、血小板计数的原理、方法、评价、临床意义难点:细胞形态学血液一般检查在临床上应用最广泛红细胞参数检查包括白细胞参数检查血小板参数检查其中红细胞计数(RBC)﹑血红蛋白测定(Hb)﹑白细胞计数(WBC)﹑白细胞分类计数(DC)等四项应用最多,旧称为血常规。血液一般检验的方法有两种:手工法:用显微镜单项计数;血液分析仪法:多项计数三分群血液分析仪结果报告单WBC白细胞计数LYM#淋巴细胞绝对值LYM淋巴细胞百分比MID#中间细
2、胞绝对值MID中间细胞百分比GRAN#中性粒细胞绝对值GRAN中性粒细胞百分比RBC红细胞计数Hb血红蛋白测定HCT血细胞比容MCV红细胞平均体积MCH红细胞平均血红蛋白含量MCHC红细胞平均血红蛋白浓度RDW红细胞体积分布宽度PLT血小板计数MPV血小板平均体积PCT血小板比容PDW血小板体积分布宽度三分群血液分析仪检测指标(21项)白细胞直方图红细胞直方图血小板直方图第二节白细胞参数检查一、白细胞计数【显微镜法原理】用稀醋酸溶液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞,混匀充入计数池,在显微镜下计数一定体积内的白
3、细胞数,经过换算求得每升血液中的细胞数。有二个计数池,每个计数池有9个大方格,每个大方格长、宽均是1mm,加特制盖片后高度为0.1mm。故1个大方格体积为0.1mm3。计数板的结构白细胞白细胞白细胞白细胞红红红红红【计算】WBC/L=---------×10×20×1064四大格白细胞总数=----------------------------×10920四大格白细胞总数÷4:算出每大格内平均白细胞数(0.1μl)×10:换算为1μl的容积;×20:稀释倍数×106:换算成每升血中浓度【结果报告】WBC:Δ
4、ΔΔ×109/L第二节白细胞参数检查【方法学评价】1.显微镜计数法:为血液分析仪校准的基本方法(严格规范下)。简单易行,不需昂贵仪器。但影响因素多:微量吸管、计数板、细胞分布范围、人为因素等,重复性差。2.血液分析仪法:快速、标准化、精确性高、适合大规模人群检查。但某些人为或病理因素可干扰白细胞计数。第二节白细胞参数检查【质量控制】(一)计数误差1、技术误差:是由于操作不正规或使用器材不准确造成的误差。(1)器材:清洁、干燥、校准(2)标本要求:采血迅速,避免凝血,深度适宜,不能过度挤压,稀释度要准。(3)盖
5、片放置方式:推式加盖玻片法,更能保证充液体积高度为0.1mm。第二节白细胞参数检查(4)充池要求:(5)细胞分布较均匀,若每大格间细胞数相差>8个时,应重新充池计数,二次重复计数结果相差不>10%。【质量控制】(一)计数误差1、技术误差:第二节白细胞参数检查(6)对压线细胞的计数原则:数上不数下数左不数右【质量控制】第二节白细胞参数检查(7)白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,因此在病理情况下周围血出现有核红细胞时,可使白细胞数偏高,应进行校正:【质量控制】WBC/L(真值)=X×----------------
6、100+Y100X:校正前白细胞数Y:分类100个白细胞时,遇到的有核红细胞数第二节白细胞参数检查2、固有误差:在每次计数时,不可避免产生的误差,包括:计数域误差吸管误差固有误差计数室误差第二节白细胞参数检查2、固有误差:1)计数域误差:由于每次充池后,细胞在计数池分布不可能完全相同所造成的误差,叫计数域误差。一、白细胞计数第二节白细胞参数检查2、固有误差:1)计数域误差:细胞在计数室内随机分布符合Poisson分布,其细胞计数的标准差(s)为:s=√m,m为重复计数均值细胞计数域的变异系数(CV)为:CV(
7、%)=s/m×100%=√m/m×100%=1/√m×100%意义:CV可以通过计数细胞增多而变小。第二节白细胞参数检查2、固有误差:1)计数域误差:当白细胞<3.0×109/L时,可数8格内白细胞数(二个池),或吸40ul血降低稀释倍数,结果除2。当白细胞>15.0×109/L可适当增加稀释倍数。第二节白细胞参数检查2、固有误差:1)计数域误差:2)吸管、计数室误差:由于不精密所致。可通过计数次数越多,即使用吸管、计数室次数越多误差将减少。第二节白细胞参数检查2、固有误差:1)计数域误差:2)吸管、计数室误
8、差:3)固有误差总变异系数的数学公式:1002+4.62+4.72CV=√nbncnpnb所数细胞总数nc计数板使用次数np吸管使用次数第二节白细胞参数检查3、生理状况的影响:运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒可出现一过性增高,一日内可差1倍;吸烟者平均比不吸烟者高30%,所以,最好是定时检查一、白细胞计数【质量控制】(一)计数误差第二节白细胞参数检查(二)质量考核与评价【显微镜计数法】尚无完善考核评