《细胞生物学》120 细胞增殖及其调控ppt课件.ppt

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1、CELLPROLIFERATIONANDDIVISIONREGULATION细胞增殖及其调控第十二章提要第十二章细胞周期及其调控细胞周期细胞分裂细胞周期调控成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿衰老和死亡的细胞。受精卵→初婴1012个细胞→成人1014个细胞细胞增殖意义种族繁衍、个体发育机体修复组织更新第十二章细胞周期及其调控讨论1对生物来说，细胞分裂的意义有哪些？细胞周期第一节第十二章细胞周期及其调控一、细胞周期概念细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程事件现象所需的时间第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期G1期从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙

2、时间。S期DNA复制时期。G2期DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间。M期又称D期，细胞分裂开始到结束。第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期1细胞周期时期划分Atypicalmammaliancellhasacellcycletimeof24hours,with12hrG1,6-8hrS,3-4hrG2,and1hrMSynthesisphaseGap2mitosisordivisionGap1EucaryoticCellCycle第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期2细胞周期性类型连续分裂细胞休眠细胞不分裂细胞细胞周期中连续运转，又称周期细胞，如表皮

3、生发层细胞、部分骨髓细胞暂不分裂，适当刺激下可重新进入周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。不可逆脱离细胞周期，不再分裂，又称终端细胞，如神经、肌肉细胞等。第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期二、细胞周期各时相主要事件1G1期特点：变化多如小鼠食道上皮细胞G1期长达103小时，而十二指肠上皮细胞G1期仅为6小时。rRNA、tRNA、mRNA合成加快，结构蛋白和酶形成。B生化上的复杂性AG1期持续时间易变性第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期－－认为G1期存在一个限制点（restrictionpoint）或检验点（checkpoint），控制G1期向S

4、期的过渡，即细胞的增殖。同样还存在G2期等检验点。C细胞趋向多样性进入周期进入G0期进入终端分化。第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期checkpointrestrictionpointDNA是否损伤细胞外环境是否适宜细胞体积是否足够大DNA是否复制完成DNA是否损伤，细胞体积是否足够大纺锤体是否连到染色体上M期检验点G2期检验点S期检验点G1期检验点2S期3G2期4M期DNA合成，组蛋白合成及核小体形成为分裂作准备，合成各种因子，如微管、微丝、染色体凝集因子第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期讨论2组蛋白是在细胞周期的哪个时期合成的？讨论3与细胞分裂有关的

5、各种因子，如微管、微丝等，是在细胞周期的哪个时期合成的？三、细胞周期时间的测定第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期标记有丝分裂百分率法脉冲标记DNA复制和有丝分裂指数观察测定法percentagelabelledmitoses流式细胞仪测定法G1SG2M细胞数周期假设200020hrS期10hrG1期6hr3hr1hr则细胞数S期600G2期M期标记有丝分裂百分率法测定细胞周期G1SG2M标记有丝分裂百分率法测定细胞周期程序A脉冲标记B定时取材C放射自显影技术显示标记细胞D统计标记有丝分裂细胞百分数1hr2hr3hr4hr5hr7hr6hr6000hr5004

6、003002001000001002003003003003002000000100100100100细胞数周期假设200020hrS期10hrG1期6hr3hr1hr标记后G2期M期M期G2期S期G2期000001002003008hr01001004003.5hr250300500S标记有丝分裂百分率法测定细胞周期第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期标记有丝分裂百分率法测定细胞周期脉冲标记TdR胸腺嘧啶脱氧核苷thyminedeoxyribonucleosideDNA特异前体，能S期细胞摄入，掺入DNA通常使用3H或者14C标记的TdR计算方法讨论4标记有

7、丝分裂百分率法测定细胞周期，使用TdR的理由？人工同步化四、细胞周期同步化第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期DNA合成阻断法培养基中过量TdR抑制对数生长期细胞的S期原理过量TdR培养基培养T>TG2+TM+TG1S期G1/S正常培养基培养T>TS脱离S期阻断释放停留在停留在过量TdR培养基培养G1/ST>TSG1SG2MG1SG2MG1SG2M阻断第十二章细胞周期及其调控第一节细胞周期双阻断特点又称TdR双阻断法DNA合成阻断法讨论5总结：DNA合成阻断法进行细胞周期同步化，为什么要阻断两次？优点Hela2mol·L−1；CHO7.5mol·L−1过量Td

8、R阻断一次，细胞停留在S