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时间:2020-10-03
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1、第一节DNA的生物合成一.DNA的复制复制部位:真核生物:细胞核原核生物:细胞质的核质区(一)复制的反应n1dATPn2dCTPn3dGTPn4dTTPDNA聚合酶DNA模板DNA+(n1+n2+n3+n4)PPiPPi随即被焦磷酸酶水解,从而推动聚合反应的进行。一.DNA的复制(二)复制的方式DNA复制时,亲代DNA的双螺旋先解旋并分开,然后以每条链为模板,按照碱基配对原则,各形成一条互补链。这样,从亲代的一个DNA双螺旋分子复制成两个与亲代的碱基序列完全相同的子代DNA分子。每个子代DNA分子中,有一条链来自亲代DNA
2、,另一条则是新形成的,这样的复制方式叫做半保留复制(semiconservativereplication)。半保留复制一.DNA的复制半保留复制(二)复制的方式一.DNA的复制如何证明半保留复制(二)复制的方式一.DNA的复制1958年,Meselson证明:用,15NH4Cl唯一氮源培养大肠杆菌,之后,用14NH4Cl培养,然后进行CsCl2进行密度梯度离心。由于15NH4Cl密度大于14NH4Cl,因此,形成不同区带,经过若干代培养后,两个14NH4Cl区带增多。(二)复制的方式一.DNA的复制半保留复制全保留复制(
3、三)复制反应注意点DNA复制除入DNA聚合酶,DNA模板,dNTP外,还需要多种蛋白质因子、引物、Mg2+等.一.DNA的复制特点:A对利福平不敏感B核糖核酸代替脱氧核糖核酸DNA聚合酶催化活性功能5'→3'聚合3'→5'核酸外切5'→3'核酸外切原核生物DNA聚合酶Ⅰ+++切去引物RNA,补上正确的DNA片段DNA聚合酶Ⅱ++与修复有关(活性低)DNA聚合酶Ⅲ++负责链的延长(活性高)(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制1.DNA聚合酶(DNApolymease)Morethan90%oftheDNApol
4、ymeraseactivityobservedinE.coliextractscanbeaccountedforbyDNApolymeraseI(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制DNApolymeraseIIIismuchmorecomplexthanDNApolymeraseI,havingtentypesofsubunits(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制DNA聚合酶催化活性功能5'→3'聚合3'→5'核酸外切5'→3'核酸外切真核生物DNA聚合酶a+切去引物RNA,补上正确的DNA片段D
5、NA聚合酶b+DNA聚合酶g+负责链的延长DNA聚合酶d++负责先导链的延长(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制2.DNA聚合酶(DNApolymease)(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制2.DNA聚合酶(DNApolymease)3'→5'核酸外切2.DNA聚合酶(DNApolymease)Everycellcontainsseveraldifferentnucleases(核酸酶),belongingtotwobroadclasses:exonucleases(核酸外切酶)andendonuclease
6、s(核酸内切酶).Exonucleasesdegradenucleicacidsfromoneendofthemolecule.核酸外切Exonucleasesdegradenucleicacidsfromoneendofthemolecule.Manyoperateinonlythe5'→3'orthe3'→5'direction,removingnucleotidesonlyfromthe5'orthe3'end,respectively,ofonestrandofadoublestrandednucleicacido
7、rofasingle-strandedDNA.(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制Endonucleasescanbegintodegradeatspecificinternalsitesinanucleicacidstrandormolecule,reducingittosmallerandsmallerfragments.Afewexonucleasesandendonucleasesdegradeonlysingle-strandedDNA.Thereareafewimportantclassesofendon
8、ucleasesthatcleaveonlyatspecificnucleotidesequences.(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制5'→3'核酸外切一.DNA的复制(四)参与复制的酶和蛋白质一.DNA的复制DNAReplicationRequiresManyEnzymesandProte
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