植物生物学实验（二）植物生理学基础与综合实验.ppt

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1、植物生物学实验(二)植物生理学基础与综合实验南京师范大学生命科学学院实验五、植物呼吸速率的测定——小篮子法一、实验目的与要求掌握小篮子法测定植物种子呼吸速率的原理与步骤；比较不同萌发阶段绿豆种子的呼吸速率。二、实验原理1、植物的呼吸作用定义：是植物体吸收氧气，将有机物转化成二氧化碳和水并释放能量的过程。葡萄糖+6O26CO2+6H2O+能量意义：代谢的中心有机物转化的枢纽能量的主要供应渠道2、测定呼吸速率的常用方法红外线CO2气体分析仪(IRGA)CO2可以吸收特定波段的红外辐射。当被检CO2气体通过IRGA的气室时，可使红外辐射减少或增加，且变化幅度取决于C

2、O2的浓度。这种变化可被IRGA的检测器所检定，且以电讯号的形式输出，由记录仪所记录。氧电极法3、小篮子法密闭容器中加入一定量碱液[一般用Ba(OH)2]，并悬挂植物材料，则植物材料呼吸放出的CO2可为容器中Ba(OH)2所吸收，然后用草酸滴定剩余的Ba(OH)2，从空白和样品二者消耗的草酸溶液之差，可计算出呼吸释放的CO2量，具体反应式：Ba(OH)2+CO2BaCO3+H2OBa(OH)2+H2C2O4BaC2O4+2H2O以酚酞指示滴定终点。1mL的1/44mol/L草酸溶液中的草酸与1mg的CO2等摩尔数。空白和样品二者消耗的草酸溶液的mL数差值=Ba

3、(OH)2溶液吸收的CO2mg数=种子呼吸作用释放的CO2mg数三、实验材料与试剂材料浸种和催芽不同时间的小麦或绿豆种子；试剂0.05mol/L的Ba(OH)2；1/44mol/L的草酸；酚酞指示剂。1#种子2#实验装置图四、实验步骤取具玻璃塞和橡皮塞的500mL广口瓶各1只，分别编号1#、2#；2.称取10g不同萌发阶段的种子，以纱布包裹，悬挂在橡皮塞下方；3.向两瓶内各加入Ba(OH)2溶液20mL，立即封口，室温放置。1#种子2#实验装置图不时轻摇两瓶，1h后，拔除瓶塞，各加酚酞指示剂2滴，立即以塑料袋分别封口；将滴定管下端插入瓶中，以草酸滴定Ba(OH

4、)2，记录所用草酸体积V1和V2。五、计算呼吸速率(mgCO2/gFW.h)=(V1-V2)/(W×t)六、思考题在本实验呼吸测定怎样排除不应有的干扰因素？在实验过程中为什么要轻摇广口瓶数次？就计算公式而言，为什么草酸的用量可代表种子呼吸放出的CO2的量？草酸（1/44mol/L）滴定Ba(OH)2(0.05mol/L)，酚酞作指示剂，溶液由紫色变成无色，滴定至终点后，马上颜色又由无色变成紫色，原因是什么？白天在实验室测定植物茎叶的呼吸速率会受到什么影响？如何解决？如果实验材料选择的是不同萌发阶段的小麦种子及幼芽，哪一阶段的呼吸速率最大？