超临界流体萃取活.ppt

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1、超临界流体萃取活性污泥中的微生物磷脂脂肪酸文章来源及作者主要内容结论实验流程实验结果研究背景及目的研究背景活性污泥是微生物群体及它们所依附的有机物质和无机物质的总称。微生物群体主要包括细菌，原生动物和藻类等。活性污泥主要用来处理污废水。磷脂脂肪酸(PLFA)是微生物细胞膜主要成分，是由甘油酸第三位羟基被磷酸、其它羟基为脂肪酸酯化而成，其磷酸基部分称为极性头部，两条碳氢链称为非极性尾部。研究目的：微生物群落特征对环境卫生至关重要，而分析磷脂脂肪酸的组成是研究微生物种群最常用的免培养工具之一。本实验主要探究超临界流体萃取对于

2、活性污泥中提取磷脂脂肪酸的适用性和最佳实验条件。实验流程萃取PLFA超临界流体萃取（SFE）液体溶剂萃取（LSE）单因素实验（调节剂、萃取时间、温度、压力）衍生化气相色谱-质谱联用分析PLFA样品制备从曝气池中获取活性污泥→真空冷冻干燥24h→碾碎、筛选→收集﹤500μm的粒子→储存在-20℃PLFA+0.5N氯化氢的甲醇溶液→水浴→与3mL正己烷混合→离心→转到琥珀瓶→蒸发、干燥0.1g样品与CO2和调节剂混合→萃取→收集脂质→干燥→单因素实验0.1g样品+氯仿、甲醇、磷酸缓冲液→萃取总脂质→氯仿、丙酮、甲醇的硅酸柱→

3、分离出磷脂→蒸发、干燥实验结果一、两种方法萃取的磷脂脂肪酸色谱图C14:0C15:0C16:0C16:1C17:0C18:0C18:1ω9cC18:2ω6cC23:0C24:0液体溶剂萃取超临界流体萃取二、单因素实验结果1、调节剂对提取率的影响25MPa，80℃，2.7mL/min，10%的甲醇，萃取15min2、萃取压力对提取率的影响3、萃取温度对提取率的影响4、萃取时间对提取率的影响三、两种方法得到的磷脂脂肪酸的组成与提取率的比较（超临界流体萃取）（液体溶剂萃取）超临界流体萃取液体溶剂萃取香农多样性指数1.9291.

4、940均匀性指数0.8380.809结论1、磷脂脂肪酸的最佳萃取条件：温度：80℃、压力：25MPa、CO2流速：2.7mL/min、10%(v/v)甲醇提取15min。2、超临界流体萃取可节省时间并使用更少的有机溶剂。3、通过磷脂脂肪酸的组成来分析微生物群落结构，超临界流体萃取是一种可替代、有效的方法。参考文献ZhenB,HongBoH,WeiZ,etal.PLFAstechniqueandit’sapplicationinthestudyofsoilmicrobiology[N].ACTAECOLOGICASINIC

5、A,Vol.26,No.7Jul,2006.袁海龙,李仙逸,张纯,等.超临界流体萃取-高效液相色谱法测定何首乌中磷脂成分[N].药学学报,1999,34(9)：702~705.请老师同学批评指正！谢谢观赏