人教版高中生物选修3知识点背诵.pdf

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1、酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯生物选修三键。易考知识点背诵3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。专题1基因工程③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、基因工程的概念结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。基因工程是指按照人们的愿望，进行严格（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在D

2、(二)基因工程的基本操作程序NA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。第一步：目的基因的获取（一）基因工程的基本工具1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人制酶）工合成。人工合成目的基因的常用方法有反（1）来源：转录法_和化学合成法_。主要是从原核生物中分离纯化出来的。3.PCR技术扩增目的基因（2）功能：（1）原理：DNA双链复制能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷（2）过程：酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。第一步：加热至90～95℃

3、DNA解链；（3）结果：第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DN经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有A链；两种形式：黏性末端和平末端。第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：第二步：基因表达载体的构建①相同点：都缝合磷酸二酯键。1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二和发挥作用。酯键连接起来；而T4

4、DNA连接酶能缝合两种末2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基端，但连接平末端的之间的效率较低。因(2)与DNA聚合酶作用的异同：（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接1/7部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否的蛋白质。插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，技术。位于基因的尾端。2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，（3）标记基因的作用：是为了

5、鉴定受体细胞中方法是采用用标记的目的基因作探针与mRN是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细A杂交。胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。第三步：将目的基因导入受体细胞_4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转1.转化的概念：基因抗虫植物是否出现抗虫性状。是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（三）基因工程的应用2.常用的转化方法：1.植物基因工程：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基法是农杆菌转化法，其次还有基因

6、枪法和花粉因改良植物的品质。管通道法等。2.动物基因工程：将目的基因导入动物细胞：最常用的方法提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精因动物生产药物。卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作3.基因治疗：为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗把正常的外源基因导入病人体内，使该传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆基因表达产物发挥作用。2+菌，其转化方法是：先用Ca处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子（四）蛋白质工程的概念溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基

7、础，通过基因修饰度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造过程。一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。存在的蛋白质）第四步：目的基因的检测和表达专题2细胞工程2/7动物细胞培养就是从动物机体中取出相关（一）植物细胞工程的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜1.理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程