组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用.pdf

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1、岭南现代临床外科2014年6月第14卷第3期LingnanModemClinicsinSurgery，Jun．2014，Vo1．14No．3239组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用林满洲胡敏吴桂林缪辉来朱润芝黄海丽李明意【摘要】目的探讨组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用。方法分别运用组织薄片法和组织块法从人肝癌组织标本中分离培养原代肝癌细胞，分析两种方法培养成功率、细胞爬出时间、形态及GPC3的表达。结果薄片法培养成功率为66．67％，爬出细胞时间为(7．89~0．78)d，在培养第一代就能观察

2、到形态规则的细胞且周围培养环境洁净；组织块法培养成功率为61．11％，爬出细胞时间为(7．56-+0．73)d，在培养第二代能观察到形态规则的细胞。同时原代肝癌细胞和HepG2均能稳定表达GPC3。结论两种方法均能成功培养出原代肝癌细胞，但薄片法培养的细胞在形态及洁净程度上较组织块好，同时能稳定表达GPC3。【关键词】组织薄片法；人肝癌组织；GPC3；爬出细胞时间；形态中图分类号：R657．3R73—35文献标识码：A文章编号：1009—976X(2014)03—0239—05doi：10．3969／j

3、．issn．1009—976X．2014．03．004TheapplicationoftheprimarycultureoflivercancercellswiththsueslicemethodLinManzhou“．HuMin。，WuGuilin。，MiaoHuilai，ZhuRunzhi，HuangHaili，LiMingyi~．aDepartmentofofHepatobil—iarySurgery，TheAffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege；C

4、linicalMedicalResearchCenter；CLaboratoryofHepatobiliarySurgery，GuangdongMedicalCollege，Zhanjiang524000，China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheapplicationoftheprimarycultureoflivercancercellswithtissueslicemethod．MethodsThewimarylivercancerceHsfromhumanl

5、ivertissuewereisolatedbyusingtissueslicemethodandtissuepiecesrespectively，andthesuccessrateofcultivation，thecellclimbed—outtime，cellmorphology，andtheexpressionofGPC3oftwomethodswereanalyzed．ResultsTheSuccessrateofcultivationwiththetissueslicemethodwas66．

6、67％，thecellclimbed．outtimewas(7．89±0．78)d．Inthesecondgenerationofculturecellscanbeobservedwithmorphologicalrules．MeanwhileHepG2cellsandprimarylivercancerstablyexpressedGPC3．ConclusionThebothmethodscansuccessfullycuhuredprimarylivercancerceils，butitisbett

7、erwithtissueslicemethodtoraisethelivercancercellsinthecellmorphologyandcleanlinessandwhichcanstablyexpressGPC3【Keywords】Tissueslicemethod；Livercancertissue；GPC3；Cellclimbed．outtime；Cellmorphology自Rheinwald等⋯从滋养层组织中培养出细文采用组织薄片法从人肝细胞肝癌组织中培养出胞后，研究者一直在进行研究及寻

8、找更加有效、简较纯净且稳定的肝癌细胞，并介绍该方法的实用便培养方法及培养出更加优化的目标细胞。目前性。原代细胞培养常用的两种方法组织块法和酶消化1材料和方法法，均存在较多的缺点，如细胞生命周期有限，细胞群中基因型和表型的一致性表达不稳定2I，本1．1研究对象人肝癌组织标本取自2012年9月至2013年基金项目：广东省科技项目(2008B030301028)；广东医学院2月在广东医学院附属医院肝胆外科住院手术治科技创新基金(STIF20110