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1、望尔生物技术引领科技进步WE-CP-A091北京望尔生物技术有限公司磺胺“三合一”ELISA检测试剂盒说明书地址:北京市昌平区回龙观国际信息产业基地高新四街8号邮编:102206电话:总机010—80700520/21/22/23/24销售:214/226/220技术支持:213/307网址:http://www.Wangerbio.comEmail:bjwanger010@163.com望尔生物技术引领科技进步WE-CP-A091一、概要磺胺类药物(SAs)是应用广泛的抗菌素,对畜禽疾病控制和治疗起到重要作用。但由于磺胺类药
2、物存在严重副作用,人体中长期存在磺胺类药物会导致许多细菌对磺胺类药物产生耐药性,且有潜在的致癌性。我国农业部第235号文件规定其残留限量为100mg/kg,由于高效液相色谱等仪器分析方法样本前处理及测定操作繁琐和费用高,推广使用受到限制。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,操作时间仅需1.5小时,能最大限度地减少工作强度和操作误差。2005年10月,按农业部《关于加强兽药残留检测试剂(盒)管理的通知》(农办医〔2005〕3号)的要求,该试剂盒在农业部
3、实行了备案(中华人民共和国农业部公告第558号文件)。二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物磺胺甲基嘧啶(SM1)、磺胺二甲基嘧啶(SM2))、磺胺间二甲氧嘧啶(SDM)与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗三者的抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中磺胺类药物的残留量。三、适用范围可定性、定量检测动物组织(肌肉/肝脏/鱼/虾)、鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清等样品中磺胺甲基嘧啶(SM1)
4、、磺胺二甲基嘧啶(SM2))、磺胺间二甲氧嘧啶(SDM)药物的残留量。四、交叉反应率磺胺二甲基嘧啶(SM2)………………………………100%磺胺间二甲氧嘧啶(SDM)……………………………23%磺胺甲基嘧啶(SM1)…………………………………12%五、使用单位需自备的设备及试剂设备:┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm┅┅旋转蒸发仪/氮气吹干装置┅┅均质器┅┅振荡器┅┅涡旋仪┅┅离心机┅┅天平:感量0.01g┅┅刻度移液管:10ml┅┅洗耳球┅┅容量瓶:1L┅┅玻璃试管:10ml┅┅聚苯乙烯离心管:1.5ml、50ml┅┅微
5、量移液器:单道20ml~200ml、100ml~1000ml多道250ml试剂:----乙腈(分析纯)(动物组织专用)----乙酸乙酯(分析纯)----正己烷(分析纯)----十二水合磷酸氢二钠(分析纯)----二水合磷酸二氢钾(分析纯)----氯化钠(分析纯)----氯化钾(分析纯)----去离子水六、提供的材料与试剂1、96孔酶标板×1块(包被有偶联抗原)2、标准液×6瓶:(1ml/瓶)0ppb,1ppb,3ppb,9ppb,27ppb,81ppb3、高浓度标准品:(1ml/瓶)1ppm4、酶标二抗7ml……………………红
6、色帽5、抗体工作液10ml……………………绿色帽6、底物液A液7ml……………………白色帽7、底物液B液7ml……………………红色帽8、终止液7ml……………………黄色帽9、20×浓缩洗涤液40ml………………………透明帽10、20×浓缩提取液50ml………………………蓝色帽七、溶液的配制配液1:0.02MPBS1缓冲液称取5.36g十二水合磷酸氢二钠、0.20g二水合磷酸二氢钾、8.00g氯化钠和0.20g氯化钾加去离子水溶解定容至1L配液2:提取工作液用去离子水将20×浓缩提取液按1:19体积比进行稀释(1份20×浓缩提取
7、液+19份去离子水)用于样本的提取,提取工作液在4℃环境可保存一个月。配液3:洗涤工作液用去离子水将20×浓缩洗涤液按1:19体积比进行稀释(或按需量稀释)(1份20×浓缩洗涤液+19份去离子水)用于酶标板的洗涤,洗涤工作液在4℃地址:北京市昌平区回龙观国际信息产业基地高新四街8号邮编:102206电话:总机010—80700520/21/22/23/24销售:214/226/220技术支持:213/307网址:http://www.Wangerbio.comEmail:bjwanger010@163.com望尔生物技术引领科
8、技进步WE-CP-A091环境可保存一个月。八、样本前处理步骤样本处理前须知处理任何样本时,都必须注意:(a)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。(b)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁净实验器具,以避免污染干扰实验结果。(c)低检测限组织样本
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