细胞凝集反应.ppt

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1、细胞凝集反应浙江中医药大学胡林峰一、实验目的1.观察血细胞的凝集现象。2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理。二、实验的原理凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，能与细胞外被的寡糖链相连接，使细胞发生凝集。①细胞质膜外表面的一层黏性多糖物质构成的细胞被在细胞间的联系和识别、细胞的生长分化、免疫反应及肿瘤发生等过程中发挥着重要作用。②动物细胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖链伸向膜表面，它们是细胞识别、细胞免疫及细胞接触抑制现象的必要组分。③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在

2、细胞间形成“桥”的结果。④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价，并与细胞膜上受体的分布有关。三、实验用品1．器材:显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架2．材料:土豆块茎3．试剂:２％鸡血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、生理盐水和其他等渗液。四、实验步骤1．2％鸡血红细胞悬液制备新鲜鸡血加抗凝剂，生理盐水洗2次，每次3000rpm，离心5min，按红细胞压积用生理盐水配成2％鸡血红细胞悬液。2．土豆凝集素制备土豆2克，加10mlPBS，浸泡2h3．细胞凝集反应土豆凝集素1滴、2％鸡血红细胞液1滴，载玻片上混匀，静置20min4

3、．对照PBS1滴、2％鸡血红细胞液1滴实验操作五、实验报告1.绘制简图，表示血细胞的凝集过程；2.图示血细胞凝集的原理。实验总结答：因为凝集素中本身含PBS缓冲液，当含本身凝集素是不含PBS的，只是因为本实验中凝集素的提取时用到了PBS。1.为什么对照组有PBS液作对照呢？答：无菌抽取动物静脉血液，当然血液抽出来后肯定要先加抗凝剂了，然后再加生理盐水。那么怎么从血液中将红细胞分离出来呢？用离心机在1500rpm下离心5min，去掉上清液，得到的就是红细胞了，再加适量生理盐水洗涤几次后，加一定量(按压积红细胞体积算)生理盐水即可配成相应浓度的红细胞悬液了。2.那么红细

4、胞悬液是怎么制备的呢？