果汁中柑橘属成分实时荧光PCR检测方法-论文.pdf

《果汁中柑橘属成分实时荧光PCR检测方法-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2014年8月食品研究与拜蔽FoodResearchAndDevelopment检测分析第35卷第16期·==8DOI：10．3969~．issn．1005-6521．2014．16．022果汁中柑橘属成分实时荧光PCR检测方法梁字斌，牟靖芳，李晓明，梁德沛(广东产品质量监督检验研究院，国家食品质量监督检验中心(广东)，广东顺德528300)摘要：通过分析20条不同柑橘属植物的trnL基因序列，设计柑桔属植物特异性扩增引物。通过对苹果、梨、葡萄等多种水果成分的特异性筛选，建立检测柑桔属植物成分的SYBGreen实时荧光P

2、CR检测方法，该方法对柑桔DNA的检测低限为0．1pg／trL。用该方法检测10种橙汁及其饮料商品，结果表明，该方法能够检测到橙汁中的柑桔属植物成分。该方法可用于果汁或食品中柑桔属植物成分的鉴别。关键词：果汁；柑橘属植物成分；L基因；实时荧光PCR；SYBGreenReal—timeFluorescencePCRMethodfortheDetectionofCitrusComponentinFruitJuiceLIANGYu-bin，MUJing-fang，LIXiao-ming，LIANGDe—pei(ChinaNat

3、ionalQualitySupervisionandTestingCenterforFood，GuangdongTestingInstituteofProductQualitySupervision(Guangdong)，Shunde528300，Guangdong，China)Abstract：Areal-timefluorescencepolymerasechainreactionmethodusingthefluorescencedyeSYBRGreenandaimedatcitrustrnLgenesequenc

4、ewasestablishedfordetectionofcitrusDNAinfruitjuice．Thecitrus—specificprimersweredesignedaccordingtothesequencealignmentresultbetween20differentcitrustrnLgenesequences．Thecitruscomponentcouldbedetectedbythecitrus-specificprimerswithalimitofdetectionof0．1pg／p~LDNA．

5、Thefollowingdetectionof10fruitjuiceandbeveragesamplesshowedthatthismethodwassuitabletoidentifythecitruscomponentinfruitjuicebeverageandotherrelativefoodandcanprovideatechniquebaseforresearchoffruitjuiceadulterationdetection．Keywords：fruitjuice；citruscomponent；trn

6、Lgene；Real-timePCR；SYBGreen近年来，随着人民生活水平的不断提高，消费者技术开发果汁鉴伪检测技术。№与Chang等U用PCR对具有较高营养价值的果汁及果汁饮料的消费量也技术检测鲜榨橙汁与再生橙汁之间的区别。刘伟红越来越大】。巨大的市场需求导致掺伪行为涉入果汁等嘲利用PCR技术根据橙UDP一葡糖基转移酶蛋白基行业，严重损害消费者的利益。果汁鉴伪检测技术的因设计特异性扩增引物，研究出一种可用于果汁中的研究具有非常重要的实际意义。目前，人们鉴别掺伪柑橘属成分的检测及鉴伪方法。韩建勋等㈣利用实时果汁的方法

7、多基于各种水果特有的标志性化合物[2-5]。荧光PCR技术开发出一种检测果汁中梨成分的方法。但是，果汁掺假手段越来越高明，从最初的简单勾兑PalmieriL．等【l1]根据5SrRNA基因序列和ANS(antho—水发展到现在的根据原果汁的特征图谱进行调配，导cyanidinsynthase)序列设计特异性引物，用实时荧光致开展鉴伪工作的难度也越来越高嗣。PCR方法检测食品中的桔子、菠萝、蓝莓、草莓成分。分子生物技术以其简便、准确、快速、灵敏度高等但未见利用实时荧光PCR技术开展对果汁中柑橘属特点，可从基因水平分析食品原

8、料及其产品的特性与植物成分进行检测及鉴伪的研究。来源，在食品生物成分的鉴别方面展现广阔的应用前本研究通过分析多种柑橘属植物trnL基因，设景171。近年来，国内外科研工作者开始利用分子生物学计柑橘属植物特异性引物，拟建立一种可检测果汁中柑橘属植物成分的SYBGreen实时荧光PCR检作者简介：梁宇斌(1984一)，男