输血技能操作规程.doc

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1、ABO血型鉴定操作规程1方法：试管法。2原理：根据红细胞上有或无A抗原和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。正定型就是用已知抗-A和抗-B分型血清来测定红细胞A抗原或/和B抗原；反定型就是用已知A红细胞和B红细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。3标本种类：EDTA抗凝全血。4试剂及器材：抗-A、抗-B标准血清；2-5%A、B、O试剂标准红细胞盐水悬液；受检者血清；受检者2-5%红细胞盐水悬液；生理盐水。试管架；清洁干燥试管；清洁干燥吸管；清洁干燥载玻片；生物显微镜；离心机（或血库专用离心机）。5操作步骤：5

2、.1检查所用试剂的批号、外观、有效期及相应的器材。……（20分）5.2检查标本的状态。……(5分)5.3标本离心：1000×g离心3分钟。……(5分)5.4加样：……(20分)正定型：取洁净小试管2支，分别标明抗-A、抗-B。分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者3-5%红细胞悬液1滴，混和。反定型：另取洁净小试管3支，分别标明A、B、O细胞。用滴管分别加入受检者血浆2滴于试管底部，再分别加入3-5%A、B、O试剂红细胞1滴。5.5离心：立即以1000×g离心15秒。……(15分)5.6观察结果：检查是否有溶血，再将试管轻轻摇动，使沉于试管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无

3、凝集。如肉眼未见凝集或溶血，应再以低倍镜观察有无凝集。……(15分)5.7ABO血型结果判读。……（结果错误一票否决）ABO血型正反定型结果正定型反定型分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞抗-A抗-BA细胞B细胞O细胞 ＋—A—＋——＋B＋———　—O＋＋—＋＋AB———注：　＋＝凝集；　　－＝不凝集　6注意事项：6.1要求标本离心速度1000×g离心3分钟，保证标本的质量。6.2试管、滴管保持干燥，以免溶血。6.3离心时间不宜过长或过短、速度不宜过快过慢，以防假阳性和假阴性。RH（D）血型鉴定操作规程1方法：试管法。2原理：根据D抗体与对应红细胞上的抗原凝集反应

4、，区分Rh(D)阳性、阴性。3标本种类：EDTA抗凝全血。4试剂及器材：IgM单克隆抗D血清，效价≥1：64（ccDee）型；生理盐水。试管架；清洁干燥试管；清洁干燥吸管；清洁干燥载玻片；生物显微镜；离心机（或血库专用离心机）。5操作步骤：5.1检查所用试剂的批号、外观、有效期及相应的器材。5.2检查标本的状态。5.3标本离心：1000×g离心3分钟。5.4加样：标记试管1支，加抗D血清１滴，再加受检者3-5％红细胞悬液１滴，混匀。……（10分）5.51000×g离心15秒,轻轻摇动试管，观察结果。……（10分）5.6检查是否有溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇

5、晃使红细胞再悬浮起来，观察凝集的状况，并立即记录结果，必要时可借助显微镜。5.7若是阴性结果，需37℃孵育15-30分钟，然后再离心观察结果。结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。（本次考试不作要求）6结果判定：……（结果错误一票否决）6.1阳性反应：出现红细胞凝集，为Rh(D)阳性。6.2阴性反应：红细胞不出现凝集，为Rh(D)阴性。7备注：凝集强度判断标准4+：红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3+：红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。2+：红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞。1+：肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。±：镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细

6、胞。-：镜下未见红细胞凝集，红细胞均匀分布。MF：即混合凝集外观，是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布。盐水+凝聚胺介质法筛选不规则抗体操作规程1方法：试管法。2原理：由于输血或妊娠等外源性抗原的同种免疫作用，使机体对外源性抗原产生同种免疫抗体，当再次输入相应抗原时就会产生抗原抗体反应。应用特定的筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号），与待检者血清（或EDTA抗凝血浆）在二种介质（盐水、凝聚胺）中反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别(IgM、IgG)。对筛选试验阳性的待检者应检查其抗体特异性即不规则抗体鉴定（本次考试不作要求）。3标本种类：EDTA抗凝全血或不抗凝

7、血。4试剂及器材:特定的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号2-5%筛选红细胞；低离子强度溶液（LIM）、凝聚胺溶液、悬浮液；生理盐水。试管架；清洁干燥试管；清洁干燥吸管；清洁干燥载玻片；生物显微镜；血库专用离心机。5操作步骤:5.1检查所用试剂的批号、外观、有效期及相应的器材。5.2检查标本的状态。5.3标本离心：1000×g离心3分钟。5.4取洁净试管3支，分别标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，用滴管分别加入待检者血清（或EDTA抗凝血浆）4滴。……(15分)5.5再对应加入2-5%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选谱红细