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《浅谈混合培养微生物好氧降解对硝基苯胺的特性研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、摘要：木文以对硝基苯胺为目标污染物，通过富集培养某化工厂好氧处理池的污泥，获得了对该污染物降解效果较好的混合培养微生物。川该微生物作为降解菌源，对对硝基苯胺的生物降解特性进行了初步的实验研究。1•刖R硝基苯胺（NA）的三种异构体：邻硝基苯胺、间硝基苯胺、对硝基苯胺，是印染、橡胶、制药、槊•料和油漆等行业的重要原料，是染料丁•业的屮间体。这3种化合物可通过呼吸道、消化道而摄入体内，使氧和血红蛋白变为高铁血红蛋白，影响组织细胞供氧而造成内窒息，且被认为对人体冇很强的致癌性。苯胺类化合物对环境的污染一直被人们所关注，我国把苯胺类化合物列入环境屮的重点污染物，并制定最高容许排放浓度5mg/Lo此类
2、化工废水治理较为困难，国内研究较少，至今为止绝大多数采用物理、化学的方法加以处理，但这些方法处理费用偏高，操作要求较为严格，实际上难以推广运用。因而迫切需要寻找一些行Z有效的、费用相对低廉的处理方法。木文以对硝基苯胺为目标污染物，通过富集培养某化工厂好氧处理池的污泥，获得了对该污染物降解效果较好的混合培养微生物。用该微生物作为降解菌源，对对硝基苯胺的生物降解特性进行了初步的实验研究。2.实验材料与方法2.1菌种来源菌种来门某化匸厂废水处理系统好氧池污泥2.2试验仪器及设备恒温摇床；7500分光光度计；Ph计；高速离心机2.3培养液及微量元素降解菌培养基：K2HPO4-3H2O,430mg/
3、L；KH2PO4-7H2O,170mg/L；MgSO4-7H2OJ22.5mg/L；CaCI2,27.5mg/L；NaEDTA,100mg/L；Na2HPO4-7H2O,668mg/Lo基础无机盐培养基：KH2P04,1000mg/L；Na2HP04-12H20,7000mg/L；柠檬酸铁，40mg/L；CaCI2-2H2O,100mg/L；MgS04-7H20,300mg/L；PH,7.35。YPS培养液：酵母粉10g/L；蛋白B10g/L；氯化钠5g/L。微量元素(TMS)：FeCI3-6H2O：ZnCI2-4H2O：CoCI2-2H2O；Na2MoO4-2H2O；CaCI2-2H2O
4、：CuSO4-5H2O；H3BO4；HCI等。基础无机盐/TMS/YE培养液：毎1L无机培养液屮添加3mL微量元素和1g无菌酵母粉。2.4研究内容与方法2.4.1降解菌的分离2.4.1.1富集培养菌种驯化过程在30°C的恒温室中进行。首先取5mL新鲜的活性污泥加入到盛有50mLYPS培养液的250mL锥形瓶中，在120r/min转速下，连续振荡培养24h,然后从屮取10%培养液转接到新鲜的YPS培养液中。在相同的条件下继续培养24h,从屮取5mL作为接种菌液，加入到含20mg/L对硝基苯胺的基础无机盐/TMS/YE培养液中，彳0天左右培养液原黄颜色褪去。再取10mL培养液转接到新鲜的含对硝
5、基苯胺基础无机盐/TMS/YE培养液小，两天后培养液黄颜色也褪去。把此种培养液作为降解试验的接种菌液，菌体的OD值大约1.2左右，降解特性试验屮菌体的接种量均为10mLo2.4.1.2纯培养从降解速率较高的富集培养物中取样，在含有对硝基苯胺平板上划线分离，放置于30°C恒温室内培养数天，观察菌落生长情况，把形成的耐受力强单菌落挑斜面保存(即为纯培养物)。2.4.2对硝基苯胺降解特性试验pH值：对硝基苯胺初始浓度约为50mg/L,调节混合培养液初始pH值，置于30°C恒温室振荡培养36h麻，以初始培养液为空白参比测泄OD值以及对硝基苯胺去除率，确泄混合培养微生物生长适宜的pH值范囤。外加碳源
6、：对硝基苯胺初始浓度约为50mg/L、100mg/L,pH值约为7.5,分别添加Og/L、0.5g/L、1.0g/L简萄糖条件下，探明微生物能否利用对硝基苯胺作为生长的唯一碳源、氮源和能源，以及不同匍萄糖量对微生物生长及对硝基苯胺去除率的影响。基质浓度：对硝基苯胺初始浓度约为50mg/L、100mg/L.150mg/L.200mg/L,pH值约为7.5,间隔一定时间取样，测定培养液屮对硝基苯胺浓度、pH及0D值的变化。通过微生物的生长曲线、基质降解曲线等过穆來分析该混合培养微生物的基本特性。2.5分析项目和测定方法对硝基苯胺浓度：采用分光光度法，在最大吸收峰(Amax=360nm)测定其吸
7、光度。混合液经9000r/min高速离心5min,取上清液测定。根据标准曲线推算其浓度。若对硝基苯胺浓度超过10mg/L均稀释后测定。菌体浓度OD值:采用分光光度法，混合液充分摇匀麻直接在波长A=600nm测定其吸光度。溶液的菌体浓度等于实际测定的OD值减去空白值(不接菌液)的OD值。pH值：混合液充分摇匀示肓接用pH计测定。2.结果与讨论3.1pH值对降解的影响混合培养微生物对硝基苯胺初始浓度约为50mg/L,在不同初
