糖的呈色反应.doc

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1、糖的呈色 一、目的要求： ·(1)学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。 (2)了解鉴定还原糖的方法及其原理。二、实验步骤:  （一）.Molish反应——α-萘酚反应·1.实验原理 糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物与α-萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称紫环反应。自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。此外，各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸以及丙酮、甲酸和乳酸均呈颜色近似的阳性反应。因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一

2、步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。·2.试剂 Molish试剂：取5gα-萘酚用95%乙醇溶解至100mL，临用前配制，棕色瓶保存。 1%葡萄糖溶液；1%蔗糖溶液；1%淀粉溶液。·3.操作方法 取试管，编号，分别加入各待测糖溶液1mL，然后加两滴Molish试剂，摇匀。倾斜试管，沿管壁小心加入约1mL浓硫酸，切勿摇动，小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。用水代替糖溶液，重复一遍，观察结果。·（二）蒽酮反应1.实验原理 糖经浓酸作用后生成的糠醛及其衍生物与蒽酮（10-酮-9，10-二氢蒽

3、）作用生成蓝绿色复合物。2.试剂 蒽酮试剂：取0.2g蒽酮溶于100mL浓硫酸中，当日配制。 待测糖溶液，同Molish试验。 3.操作方法 取试管，编号，均加入1mL蒽酮溶液，再向各管滴加2~3滴待测糖溶液，充分混匀，观察各管颜色变化并记录。（三）.Fehling试验1.实验原理 费林试剂是含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热，则生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在，则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。 为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀，Fehlin试剂中加

4、入酒石酸钾钠，它与Cu2＋形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子，该反应是可逆的。平衡后溶液内保持一定浓度的氢氧化铜。费林试剂是一种弱的氧化剂，它不于酮和芳香醛发生反应。·2.试剂 试剂甲：称取34.5g硫酸铜溶于500mL蒸馏水中。 试剂乙：称取125gNaOH137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。临用前，将试剂甲和试剂乙等量混合。 1%葡萄糖溶液；1%蔗糖溶液；1%淀粉溶液。 ·3.操作方法 取试管，编号，各加入Fehlin试剂甲和乙1mL。摇匀后，分别加入4滴待测

5、糖溶液，置沸水浴中加热2~3min，取出冷却，观察沉淀和颜色变化。 （四）酮糖的Seliwanoff反应 ·1.实验原理 该反应是鉴定酮糖的特殊反应。酮糖在酸的作用下较醛糖更易生成羟甲基糠醛。后者与间苯二酚作用生成鲜红色复合物，反应仅需20-30秒。醛糖在浓度较高时或长时间煮沸，才产生微弱的阳性反应。·2.试剂 Sediwanoff试剂：0.5g间苯二酚溶于1升盐酸（H2O∶HCl=2∶1）(V/V)中，临用前配制。 1%葡萄糖；1%蔗糖；1%果糖。·3.操作方法 取试管，编号，各加入Sediwano

6、ff试剂1mL，再依次分别加入待测糖溶液各4滴，混匀，同时放入沸水浴中，比较各管颜色的变化过程。·注意事项 ·（1）Molish反应非常灵敏，0.001％葡萄糖和0.0001％蔗糖即能呈现阳性反应。因此，不可在样品中混入纸屑等杂物。当果糖浓度过高时，由于浓硫酸对它的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈紫色，需稀释后再做。 ·（2）果糖与Seliwanoff试剂反应非常迅速，呈鲜红色，而葡萄糖所需时间较长，且只能产生黄色至淡黄色。戊糖亦与Seliwanoff试剂反应，戊糖经酸脱水生成糠醛，与间苯二酚缩合，生

7、成绿色至蓝色产物。 ·（3）酮基本身没有还原性，只有在变成烯醇式后，才显示还原作用。 （4）糖的还原作用生成氧化亚铜沉淀的颜色决定于颗粒的大小，Cu2O颗粒的大小又决定于反应速度。反应速度快时，生成的Cu2O颗粒较小，呈黄绿色；反应速度慢时，生成的Cu2O颗粒较大，呈红色。溶液中还原糖的浓度可以从生成沉淀的多少来估计，而不能依据沉淀的颜色来判断。