高中生物第一单元第二章第一节动物细胞培养学案中图版选修32.pdf

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1、第一节动物细胞培养1．简述动物细胞培养的过程。2．描述动物细胞培养的过程。1．细胞培养的基本条件（1）无毒、无菌的环境。（2）基本的营养物质和生长因子：如葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸等。（3）人体细胞培养的标准温度：（36.5±0.5）℃；大多数细胞的适宜pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%氧气，5%二氧化碳。思考动物细胞培养液中为什么要加入5%二氧化碳？提示：维持培养液的pH。2．细胞培养的过程（1）基本过程：健康动物的组织↓剪碎，用胰蛋白酶处理单个细胞（分离细胞）↓加培养液制成细胞悬浮液培养↓传代培养细胞株传代培养↓遗传

2、物质改变细胞系①原代培养：将组织从健康动物体内取出，用浓度与活性适中的胰蛋白酶处理成单个细胞，然后用培养基配成一定浓度的细胞悬浮液，转入培养瓶培养的过程。②传代培养：把原代培养的细胞定期用胰蛋白酶将它们从瓶壁上脱离下来，重新分散成细胞悬浮液，分装到多个培养瓶中继续培养的过程。③细胞株：传代培养的细胞能传到10～50代，这种传代细胞叫做细胞株。④细胞系：细胞株传至50代后有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且有癌变的特点，有可能在培养条件下无限地传下去，这种传代细胞叫做细胞系。（2）特点：贴壁生长，接触抑制。（3）冻存及复苏。①冻存：长期保存细胞

3、一般采用超低温冻存法。将细胞和保护剂放入－196℃的液氮中进行保存。②复苏：将冻存的细胞放在37℃温水中解冻，细胞逐渐“苏醒”，再经过培养，细胞就能继续生长。思考动物细胞培养需要将组织分散成单细胞，所用的酶是什么？提示：胰蛋白酶。3．细胞培养的意义（1）生产酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等生物制品。（2）为皮肤大面积烧伤或烫伤病人培养出人工皮肤，供受伤者移植使用。（3）进行有毒物质和药物的检测。（4）在揭示细胞的全能性、细胞周期及调控，癌变机理与细胞衰老机理等基础研究中发挥了重大作用。1．为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？第1页共3页

4、血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清中含有胰岛素、生长激素等激素及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，进行细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。2．将健康动物的组织块剪碎后用胰蛋白酶处理的目的是什么？不定期用胰蛋白酶把培养细胞

5、从瓶壁上脱离的目的是什么？（1）胰蛋白酶可以分解组织细胞间质中的胶原蛋白，从而使组织分散成单个细胞。（2）细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞的生长和繁殖，培养瓶中的细胞越来越多，当贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时，就会停止分裂增殖，逐渐走向衰亡，这种现象叫做接触抑制。需要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，传代培养。胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。3．幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？细胞的衰老

6、与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼龄动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。题型一动物细胞培养【例1】（2010·浙江高考理综改编）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（）A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B．原代培养的细胞传至10代左右时，极少数细胞衰老死亡C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养解析：保留接触抑制的细胞在培养

7、瓶壁上形成单层细胞。原代培养的细胞传至10代左右时，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡，极少数细胞能存活下来并继续传下去。二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的。恶性细胞系的细胞带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传下去，所以可进行传代培养。答案：D反思领悟：细胞株和细胞系都属于传代细胞。能传至10～50代的传代细胞为细胞株；当细胞株传至50代以后，不能再传代，只有部分细胞的遗传物质发生改变，从而可能继续传下去，这种传代细胞叫做细胞系。题型二动物细胞培养的基本条件【例2】一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）①无毒的环境②

8、无菌的环境③合成培养基需加血清④温度与动物体温相近⑤需要O，不需要CO⑥CO能维持培养液的pH222A．①②③④⑤⑥B．①②③④C．①③④⑤⑥D．①②③④⑥解析：动