GB∕T 39030-2020 酶制剂生理活性评价技术规范.pdf

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1、犐犆犛０７．０８０犃２１!"#$%&''()*犌犅／犜３９０３０—２０２０!"#$%&'()*+,-犜犲犮犺狀犻犮犪犾狊狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳狆犺狔狊犻狅犾狅犵犻犮犪犾犪犮狋犻狏犻狋狔犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀犳狅狉犲狀狕狔犿犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狊２０２００７２１./２０２１０２０１01'(+,-./012./'()*3/0456犌犅／犜３９０３０—２０２０前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位：江南大学、中国标准化研究院、北京萨姆伯科技有限公司。本标准主要起草人：吴晓玲、胥传来、匡华、马爱进、王忠

2、兴、刘丽强、徐丽广、马伟、郝帅。Ⅰ犌犅／犜３９０３０—２０２０酶制剂生理活性评价技术规范１范围本标准规定了酶制剂生理活性评价基本要求、试验方法、消化促进率计算及结果表述。本标准适用于饲料和食品添加用脂肪酶制剂、蛋白酶制剂和碳水化合物水解酶制剂的生理活性评价。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６４３２饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法ＧＢ／Ｔ６４３３饲料中粗脂肪的测定ＧＢ／Ｔ１５６７２食用菌中总糖含量的测定３术语和定义下列术语和定义适用于本

3、文件。３．１酶制剂犲狀狕狔犿犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狊从生物中提取、提纯加工后的具有生物催化能力的生物制品。注：本标准中的酶制剂特指添加到饲料或食品中提高饲料或食品消化率的生物制品，包括脂肪酶、蛋白酶或碳水化合物水解酶等酶制剂。３．２体外消化模型犻狀狏犻狋狉狅犱犻犵犲狊狋犻狅狀犿狅犱犲犾在生物体外采用动物或人体内相近的消化环境和消化酶系，模拟动物或人体内消化生理过程，体外评价酶制剂对底物消化生理活性影响的体系。３．３酶制剂生理活性狆犺狔狊犻狅犾狅犵犻犮犪犾犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犲狀狕狔犿犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狊酶制剂在动物或人体内消化生理环境中，受温度、ｐＨ、消化酶等因素影响

4、表现出的对底物的消化能力。３．４胃模拟消化液狊犻犿狌犾犪狋犲犱犵犪狊狋狉犻犮犳犾狌犻犱模拟动物或人体胃液中的ｐＨ、温度、离子强度及胃蛋白酶浓度设置的消化液。３．５肠模拟消化液狊犻犿狌犾犪狋犲犱犻狀狋犲狊狋犻狀犪犾犳犾狌犻犱模拟动物或人体肠液中的ｐＨ、温度、离子强度及胰酶浓度设置的消化液。４基本要求４．１按照相关法律法规和标准要求对样品进行接收、保管、交接、配制、回收、退还／销毁处理，并制定相１犌犅／犜３９０３０—２０２０应的管理制度和程序。４．２评价使用的仪器与设备种类、数量、性能、量程、精度应能满足评价的需要。４．３评价实验结束后，实验材料应进行无害化处理。５试验方法５．１

5、试验设计应符合表１要求。表１试验设计项目酶制剂产品处理设计试样实验组、空白对照组酶制剂选择根据评价目标和评价需要选择一种或多种重复次数不少于３次５．２样品溶液制备５．２．１固体酶制剂待测生物产品若为块状固体产品应进行粉碎或充分研磨处理，过０．２５ｍｍ孔径筛。所检测固体酶制剂如果有使用说明，按其使用说明计算１００ｇ饲料或食品中所需酶制剂的量，并准确称取（若所测酶制剂无使用说明，则准确称取５０ｍｇ固体酶制剂），用水溶解，定容至１００ｍＬ，配制成０．５ｍｇ／ｍＬ的工作溶液备用。５．２．２液体酶制剂所检测液体酶制剂如果有使用说明，按其使用说明计算１００ｇ饲料或食品中所需酶制剂的量，并

6、准确量取（若所测酶制剂无使用说明，则准确吸取５０μＬ液体酶制剂），用水稀释成浓度为０．５μＬ／ｍＬ的工作溶液备用。５．３体外消化试验５．３．１试样实验组准确称取３．０ｇ食品模拟物（淀粉＋鸡蛋白＋大豆油，质量比３∶１∶１）或饲料模拟物（玉米＋麸皮＋豆粕，质量比１∶１∶１），放入５０ｍＬ具塞三角瓶中，加入１ｍＬ待测酶制剂样品溶液和８ｍＬ胃电解质溶液（参见附录Ａ的Ａ．２或Ａ．３），用１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液将ｐＨ值调至２．０，混合均匀，静置１０ｍｉｎ，加入１ｍＬ体外模拟胃液（参见Ａ．４），混合均匀，３７℃生化培养箱内振荡消化（１２０次／ｍｉｎ）４ｈ。之后，在胃模拟消化物中再加入９ｍＬ肠

7、电解质溶液（参见附录Ｂ的Ｂ．２或Ｂ．３），用１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液调整ｐＨ值至７．０。加入１ｍＬ体外模拟肠液（参见Ｂ．４），混合均匀，３７℃生化培养箱内振荡消化（１２０次／ｍｉｎ）１６ｈ。５．３．２空白对照组不加酶制剂试样，而其他处理与实验组相同。２犌犅／犜３９０３０—２０２０５．４消化残渣的处理消化结束后，三角烧瓶静置１０ｍｉｎ，消化产物通过布氏漏斗过滤，吸取１５ｍＬ丙酮清洗瓶中剩余残渣后并过滤，用丙酮清洗３次并抽干，将消化残渣转移入新的三角烧瓶中，１０５℃烘箱内烘干，备用。消化残渣处理后，根据酶制