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时间:2020-08-11
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1、皮革分析检测知识点1、氧化操作滴定管的选择:酸式滴定管:酸性、中性、氧化性溶液碱式滴定管:还原性、碱性、中性氧化操作:碘量法、高锰酸钾视线跟液面平行(凹液面)无色溶液:不带蓝底白线2、分光光度法配置标准溶液:间接法标定(用到容量瓶和移液管)可吹式和不可吹式移液管的操作方法分光光度计的使用:读取吸光度的大小(要求落在0.2-0.6之间),如何控制:(1)可调节浓度大小;(2)选择合适的参比溶液;(3)选择合适的比色皿厚度,即改变液层的厚度。可选择水或待测溶液中的任意一种试剂作为参考溶液,改变吸光度的大小,从而排除物质带来的影响(重点)3、福林酚法测定蛋白酶活力:
2、空白溶液颜色情况;用络氨酸配定标准溶液从而制定标准曲线(络氨酸用0.1mol/L的盐酸溶解,溶解完成后,再对其定容);问:为什么不用NaOH或水对其定容?(重点)答:HCl能终止酶促反应用的三氯乙酸,使得酪氨酸处于酸性环境之中4、酶活力测定时用到了(软化操作)胰酶:这与前面蛋白酶活力测定又不同,胰酶是复合酶,蛋白酶是一类酶,因此采用醋酸盐指示剂法对其测定,实验室同学实验结果有两种:(1)在全部试管中都有沉淀;(2)全部都没有沉淀以上结果都是错误的,必须解释其原因(从其原理和定义去解释),正确现象:一部分有沉淀,一部分没有沉淀。原因:全都产生沉淀可能是开始产生白
3、色沉淀时没有边滴边看,放置太久,使得酪氨酸也沉淀出来了;全都没有沉淀可能是PH没有达到酪蛋白的等电点,使得酪蛋白已经完全水解。测定3与4比较:①胰酶测定需要精称、精定容,以胰酶的重量加入计算;再者其条件比较缓和,酪素自身水解没有办法消除②蛋白酶活力的测定利用的是酪蛋白在弱酸环境中不溶的性质,而胰酶活力的测定利用的是;酪蛋白在等电点处溶解度都最低的性质(1)蛋白酶:空白溶液呈浅蓝色,原因:酪素自身水解产生酪氨酸与显示剂生成蓝色;条件现象及结果酪素和酶混合超过10min偏高,生成酪氨酸变多配置时候,研磨时间不够偏低,酶制剂活性剂暴露不完全过滤时,滤纸被打湿偏低,酪
4、氨酸浓度被稀释By-梅山林①蛋白酶活力定义:在一定温度、PH条件下,1g酶粉或1ml酶液每分钟催化蛋白或血红蛋白水解所产生酶氨酸的微克数;②为什么用1:1盐酸溶解:终止酶促反应进行时用三氯乙酸,所以生成的酶氨酸处于酸性条件下,为了提高准确性,使实测曲线尽可能与标准曲线一致;(2)胰酶:①硼酸盐溶液作用:形成缓冲溶液、利于酶促反应;②醋酸盐溶液作用:形成缓冲溶液,调节PH,使酪素沉淀;条件现象及结果配置酶蛋白在沸水加热煮沸偏高,加速了酶蛋白自身水解水溶液面低于反应液面偏低,达不到最适温度T,不能发挥最大活力恒温时间不够偏低,酶促反应不完全恒温T超过/低于40摄氏
5、度偏低,达不到最适温度T,不能发挥最大活力5、硫化钠(NaS)含量的测定:碘量法或高铁氰化钾法测定,其中在使用高铁氰化钾法测定时,要注意其颜色的变化指示实验的终点(乳黄色/淡黄色)氧化还原法的指示剂:(1)专属指示剂:淀粉、酚酞等(2)氧化还原指示剂:试亚铁灵、甲基红-亚甲基蓝等(3)自身指示剂:亚硝酰铁氰化钠Na2{Fe(CN)5(NO)},要会判断指示剂的类型6、铬鞣液中铬含量的测定:采用过氧化钠(Na2O2:作为氧化剂,并提供碱性介质)法,但其溶于水会形成过氧化氢(H2O2),因此需要加入硫酸镍(NiSO4:加入它会产生很多小气泡和沉淀,催化多余的H2O
6、2分解产生O2小气泡,沉淀为Ni(OH)2。(重点)条件现象及结果多余的H2O2没有除干净偏高,H2O2会氧化碘离子成碘单质I2--酸化后加入KI需要静置,若没有偏低,Cr2O7与I反应不完全-没有放在暗处偏高,I变成I2一开始摇动太大或没有冷却偏低,I2挥发了过早加入淀粉偏低,蓝色难褪尽或偏高加入Na2S2O37、铬鞣液中碱度的测定:其影响鞣制性能的大小,测定方法:根据铬与不同的阴离子结合形成不同的铬络合物(阳性、阴性、中性)可分为以下两种方法:(1)碱滴定法:适用于阳性铬络合物和中性铬络合物问:为什么不适合阴性铬络合物?By-梅山林答:①会影响络合物的水解
7、:Kh阳>Kh中>Kh阴;强碱滴定弱酸:Kh(阳、中)变大,Kh(阴)变小;--2--②配位体的相互取代规律:配位体与铬配位能力:OH>C2O4>SO4>Cl>H2O。(2)草酸盐法:适用于阴性络合物,因为碱滴定法测定阴性络合物会出现负碱度情况,无法观察终点。8、铬铝混合溶液中铬铝含量的测定方法:(1)配位滴定法(络合滴定法):以生成配合物为基础的滴定方法①滴定方式:返滴定:测铬铝含量;置换滴定:测铝含量,两量之差为铬含量,且铝量>铬量;直接滴定;间接滴定。问:为什么要选择置换滴定和返滴定,而不用直接或间接滴定呢?答:间接滴定应用很少,直接滴定要求反应定量完全
8、、反应速度快、有适宜的2+指示剂,而本
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