园艺植物组织培养第3章课件.ppt

《园艺植物组织培养第3章课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第三章培养基培养基是植物组织培养的重要条件。在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。3.1.1根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。3.1培养基的种类１）天然培养基天然培养基是指利用来自于各种动、植物或微生物的原料配制而成的培养基，不能确切知道它的化

2、学成分，稳定性常受原材料等因素的影响。２）合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基，它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强。３）半合成培养基在合成培养基中，加入某种或几种天然成分；或者在天然培养基中，加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。3.1.2根据培养基的物理状态来区分，可以分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。１）液体培养基所配制的培养基是液态的，其中的成分基本上溶于水，没有明显的固形物，液体培养基营养成分分布均匀，已更换，但培养过程中易缺氧。２）固体培养基在液体培养基中加入适量的

3、凝固剂即成固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂、明胶、硅胶等，以琼脂最为常用。固体培养基操作方便。３）半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。有一定的流动性。以琼脂为例，它的用量在0.2～1%之间。3.1.3根据成分是否完全来分1）基础培养基只含有大量元素、微量元素和有机营养物的培养基称为基础培养基。2）完全培养基除基础培养基成分之外，还包含不同的植物生长调节物质以及有机添加物，称为完全培养基。3.2.1.无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成。大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮

4、的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。3.2　培养基成分微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA（螯合剂）的混合，或NaFe—EDTA。3.2.2.有机营养成分植物组织培养中的培养物不同于完整的植株，没有系统的物质合成等自养功能。为了使离体的培养物能正常生长发育和分化，培养基中除需添加无机盆外，还

5、需添加碳源、维生素、氨基酸等有机成分。(1)碳源碳源物质包括糖类、醇类和有机酸，以糖类物质最为重要。一般来说；蔗糖是最好的碳源，它具有热易变的性质，经高压灭菌后，大部分可分解为D-葡萄糖、D-果糖，仅剩下部分的蔗糖，这更有利于吸收和利用。此外，也可以直接利用果糖、葡萄糖、麦芽糖、纤维二糖等。不同糖类对培养材料生长的影响不同，一般来说，以蔗糖作碳源时，离体培养的双子叶植物的根生长得更好。而以右旋糖（葡萄糖）作碳源时，单子叶植物的根生长得较好。根据培养目的的不同，蔗糖使用浓度一般在2％-5％。碳源除了在培养基中提供培养物所需的碳骨架和能源外，还可在一定程

6、度上调节培养基的渗透压，一般在-1.5～4.1MPa。(2）维生素主要有维生素Bl（盐酸硫胺素）、维生素B6（盐酸毗哆醇）、维生素B5（烟酸）、维生素C（抗坏血酸），有时还需添加维生素H（生物素）、维生素M（叶酸，有时也写作维生素Bc)、维生素B2（核黄素）等。维生素B1对愈伤组织的产生和生活力有重要作用，维生素B6能促进根的生长，维生素B5与植物代谢和胚的发育有一定关系。维生素用量一般为0.1～1.Oｍg/L、维生素C用量一般为1～100mg/L。培养基中高浓度维生素C的使用并不一定是植物生长需要，而是作为抗氧化剂以防止组织褐变。(3)肌醇又叫环己

7、六醇，在糖类的相互转化中起重要作用，也是细胞壁的构建成分。肌醇参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理活动，具有促进活性物质发挥作用的效果，在培养基中加入1.0mg/L的肌醇就足以影响维生素Bl的效应。适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成，对组织和细胞的繁殖、分化及细胞壁的形成也有作用。使用浓度一般为50一l00mg/L。(4)氨基酸氨基酸是蛋白质的组成部分，也是一种很好的有机氮源，可直接被植物细胞吸收利用。植物组织培养中最常用的氨基酸是甘氨酸，其它如精氨酸、谷氮酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。有时也应用水解乳蛋白

8、（LH)或水解酪蛋白（CH),它们是牛乳经酶法处理等加工的水解产物，是含有20种左右氨基酸的混合物，用量在1