激光共聚焦显微镜操作手册.doc

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1、LSM510andLSM510META激光扫描共聚焦显微镜简明操作手册Release3.5January2005启动系统共聚焦系统的开关·将REMOTECONTROL上的System/PC开关和Components开关置于ON的位置(图1)。打开汞灯电源开关图1REMOTECONTROL开关启动共聚焦软件LSM510·双击计算机桌面上的LSM510图标启动共聚焦软件。出现以下窗口(图3)。图3LSM510启动菜单·点击ScanNewImages按钮。·点击StartExpertMode按钮。出现以下窗口(图4)。主菜单主菜单工具栏二级工具栏图4主菜单为采集的图像建立数据库·点击主菜单工具栏

2、上的File按钮。在下一行出现File的二级工具栏(图5)。图5File的二级工具栏·点击New按钮。出现CreateNewDatabase窗口。·选择驱动器D:。·选择文件夹，输入数据库名，并点击Creat按钮。如果需要，建立新文件夹。图6CreateNewDatabase窗口图7CreateNewDatabase窗口启动激光·点击主菜单工具栏上的Acquire按钮打开Acquire下的二级工具栏(图8)。图8Acquire二级工具栏·点击Laser按钮打开LaserControl窗口(图9)。·通过点击激光单元的名字选择需要的激光。·点击Standby按钮。·当状态显示为Ready，点击O

3、n按钮。·如果没有Standby按钮，则直接点击On按钮。图9LaserControl窗口设置显微镜在直接观察和激光扫描之间切换通过VIS，TV和LSM按钮在直接观察和激光扫描之间切换光路设置：·点击VIS按钮将光路设置为通过目镜直接观察，此时激光切断。·点击LSM按钮将光路设置为激光扫描，在显示器屏幕显示图像。设置显微镜·点击VIS按钮切换到直接观察。·点击Micro按钮打开MicroscopeControl窗口(图10).选择物镜·点击Objective按钮(图10)。·点击需要使用的物镜，所选择的物镜会自动转入光路。以荧光观察方式聚焦样品·把样品放置在载物台上，盖波片要朝向物镜。·点击R

4、eflectedLight按钮，打开汞灯光闸。·点击Reflector按钮，根据样品所标记的荧光染料选择滤光片。·对样品聚焦。·选择需要观察的视野。图10MicroscopeControl窗口，如：Axiovert200M图11MicroscopeControl窗口配置光路和激光·点击LSM按钮切换到激光扫描。图12ConfigurationControl窗口·点击Config按钮打开ConfigurationControl窗口(图12)。在通道模式下配置singletrack光路·点击ChannelMode按钮(图12)。·点击SingleTrack按钮(图12)。·点击Config按钮

5、，打开TrackConfigurations窗口(图14)。·在下拉列表中选择与样品所标记的荧光染料相匹配的光路配置，并点击Apply按钮。图14TrackConfigurations窗口扫描图像·点击Scan按钮，打开ScanControl窗口(图16)。设置初始扫描参数并扫描·点击Mode按钮·点击Frame按钮设置图像类型·点击512按钮设置扫描分辨率·点击Reset按钮重置变倍和视野中心·点击Max按钮设置扫描速度·点击12Bit按钮及®按钮·选择Number为1·点击Channels按钮·点击1按钮图16ScanControl窗口·点击Find按钮优化扫描·点击图像右侧的Palet

6、te按钮，选择RangeIndicator。·点击Cont按钮进行连续扫描。·调节DetectorGain，使图像中仅留少量红色像素。·调节AmplifierOffset，使图像背景为蓝色。·点击Stop按钮停止扫描。·点击图像右侧的Palette按钮，选择NoPalette。·点击Mode按钮·点击1024或2048按钮设置较高的扫描分辨率·选择Number为2或4·点击Single按钮，完成较高质量的图像扫描保存图像·点击图像窗口右侧的Save或SaveAs按钮，打开SaveImageandParameterAs窗口·输入文件名·点击OK按钮关闭系统·点击Laser按钮，选择所使用的激光，

7、点击Off按钮。·点击File按钮，再点击Exit按钮(图5)。·关闭计算机。·等候5分钟左右，至Ar离子激光器的风扇停止运转。·将REMOTCONTROL上的Components开关和System/PC开关置于OFF(图1)。·关闭汞灯电源