基因工程的原理和操作讲课稿.ppt

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1、知识回顾：杂交育种1、原理2、过程3、优点4、不足基因重组具有不同优良性状的亲本杂交获得F1，F1自交获得F2，鉴别、选择需要的类型。可以把多个优良性状集于一个个体上只能利用已有的基因重组，不能产生新的基因；进程缓慢、过程繁琐、育种时间长；不能克服远缘杂交不亲和的生殖障碍。水母一、基因工程的原理基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果原理意义基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切→拼接→导入→表达定向地改造生物的遗传性状基因重组可按照人们意愿定向改变生物性状，培育新品种；克服远缘杂交不亲和的生殖障碍。二、基因工

2、程操作的工具1.基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶（限制酶）例如：EcoRI限制酶重播黏性末端黏性末端二、基因操作的工具1.基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶（限制酶）作用特点：作用部位：结果：分布：专一性（特异性）产生带有黏性末端或平末端的DNA片段磷酸二酯键原核生物２、基因的针线──DNA连接酶作用：形成磷酸二酯键，将两个末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。种类：T4DNA连接酶（黏性末端或平末端）E.coliDNA连接酶（黏性末端）DNA连接酶连接GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTT

3、AAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割DNA聚合酶和DNA连接酶的比较DNA连接酶DNA聚合酶不同点相同点连接DNA片段将游离的脱氧核苷酸连接到DNA片段上连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键3、基因的运载体常用的运载体：质粒、噬菌体、动植物病毒作为运载体必须具备哪些条件？1.能在宿主细胞中稳定保存并大量复制。2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。3.具有某些标记基因，便于进行筛选。三、基因工程的操作步骤1、提取目的基因2、目的基因与运载体结合用同一种限制酶切割质粒与目的基因3、将目的基因导入受体细胞

4、（不进行碱基互补配对）动物细胞：一般选用受精卵植物细胞：受精卵或体细胞微生物细胞：繁殖快、产物多4、目的基因的检测与鉴定根据标记基因判断目的基因是否导入，受体细胞表现出特定性状，说明基因完成了表达⒈要使目的基因与对应的运载体重组，所需的两种酶是()①限制酶　②DNA连接酶　③解旋酶　④还原酶Ａ．①②　Ｂ．③④　Ｃ．①④　Ｄ．②③2.基因工程的正确操作步骤是（　）①使目的基因与运载体结合　　②将目的基因导入受体细胞　③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④提取目的基因Ａ．③②④①　　Ｂ．②④①③　　　　　Ｃ．④①②③　　Ｄ．③④①

5、②1、基因工程与作物育种2、基因工程与药物研制3、基因工程与环境保护四、基因工程的应用五、转基因生物和转基因食品的安全性优点：减少农药使用，减少环境污染；解决粮食短缺问题；节省生产成本；增加食物营养价值；增加食物种类缺点：可能产生新的毒素或新的过敏原；可能产生抗除草剂的杂草；可能会损害农作物的多样性；可能干扰生态系统的稳定性；可能使疾病散播跨越物种障碍。1、基因工程的原理2、基因工程的工具3、基因工程的操作过程4、基因工程的应用课堂小结：