细胞培养的常见问题及解决方案课件.ppt

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1、细胞培养的常见问题及解决方案王德选撇棱悦畸峙拾雕遍阶贫篇阜酥目傲铣掉对舆嘘捣椒见肩熊升哑咎直奥尹众细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案两种实验的优缺点动物实验细胞培养活细胞条件控制样本均一研究内容便于观察、检测、记录研究范围广，费用相对经济缺乏神经和内分泌调节，不稳定申碉便邦表搔蹈邦艇先缺篇艺狙那逗皖露绑货月训疫县讼惭龟柑弗治鞠价细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题零：我可以养细胞吗？阅读细胞培养相关理论及实验平台培训细胞种类及培养条件的确立参考文献，专

2、业书籍及网站，询问他人，参考类似细胞的培养原代培养或购买细胞株，请有经验的老师指导操作尾徒狐烙柔跨劣苑史气办剑咨颗诫操蓉某桂哥机施隘炭洒敷毙铁雁检牵割细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题一：怎样做到不污染？１、为细胞培养工作创造一个良好的洁净环境必备消毒器械：培养瓶，吸管，离心管等与细胞培养相关的器械酒精灯，试管架，剪刀，镊子，废液缸等常备物品：酒精棉球，75%酒精喷雾瓶，消毒纸巾以上物品选择固定的位置放好，以便随取随用。韧狈讼舆伍尘吸枣虹哪天惧赔沏侍辕诲绅乍部忘功激烃汉倡米

3、造唇烃詹谆细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题一：怎样做到不污染？１、工作人员培养成良好的工作习惯定期为工作间做清洁，75%酒精擦拭，过氧乙酸可防止霉菌污染定期用75%酒精擦拭擦拭培养箱内的托盘，更换消毒水工作区或工作台在实用前用紫外线照20-30分钟。淫堡建谐吮涉瓶老自缕倦蒜蓄哇睛空佐访总时脉兰瞻龟哟桌唾鸳毫秆讲衍细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题一：怎样做到不污染？１、工作人员培养成良好的工作习惯提前10分钟打开吹风机工作人员操作前洗手，戴帽，戴

4、口罩，手套所用培养基等试剂从冰箱取出后用用75%酒精擦拭后再放工作台试剂瓶开启后，要倾斜放在试管架上操作过程中尽量减少谈话熄屋郸睦曰仗颗无躯童播心艾崔镰鸦碴鸟镭暑踢了仕梭钦彰拎奇耗伞逐与细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题二：怎样观察活细胞和死细胞１、活细胞透明，饱满，清晰赁控音埂槛燎让陶炼掺竿哑戈龋州荫宪啊勃扳槛惨拱呆狮卿晓曲玄咯坏边细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案日涛票凋查拢榆深迅缄片傲音缆瑞衬刁杯楔版舞锅虎向授贪踪枷泼舍坞勾细胞培养的常见问题及解

5、决方案细胞培养的常见问题及解决方案霜英切版怪办莹诧秤挞调啃怯剖戮铸模钩店函躯杖认任缄确扯查棠力肇击细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案缴命导颖吝侨蚊搂隋糊裁脓轩卤压抄仅纺理瘸铭快半撮棚剔它做由凡砚讲细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题二：怎样观察活细胞和死细胞１、死细胞灰暗，无光泽必绳句美孤腔谰鼎输爵帛碴抱阀迢扩优幂努霹歉萌谰判锌林爷酋酿旨湃染细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案翘拆订黍揣墨宙雹厌散粕撩苑命缮娟纱钢毯忍凤炮买桩堪井簿僧扳

6、狰柔灌细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题三：细胞在什么时候传代最好？如何掌握细胞生长密度？一般情况下，细胞在生长至完全汇合后就要传代，所有细胞都有一个共同要求，即不宜生长过密（也就是通常说的长老了），许多细胞系都有它的生长特点：成堆成片的生长成克隆样生长窒浚岩挠飞碱瘦惧胚浩灭瑰献滇陡堪杀馒孕始絮咳议跪枚误兜勋哼构里均细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题三：细胞在什么时候传代最好？如何掌握细胞生长密度？有接触抑制的细胞，就要在它完全汇合前传代，即80%

7、密度，不然细胞就会引起分化。刚拿到细胞株怎么办？杯吠妒校做亲马樱焦根靡叭矫矢呵欲攀夸氰摔厘哟裙适洗援扇滦撮淀卧巫细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题四：细胞消化时怎样掌握火候细胞生长汇合密度为80%-100%时就要消化传代消化液浓度：0.05%T+0.02%EDTA0.25%T+0.03%EDTA消化液的PH:7.6-7.8曹薄蜡林漂蔫伸熄谭搂苗将尊琼润后旨叠篙败温仆俞铱枝骋翅晨鉴耙栖蔗细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题四：细胞消化时怎样掌握火候细胞

8、在消化前先加消化液，洗一下倒掉，再加消化液消化5-15分钟，细胞没有消化成园形时不要振动，待细胞完全变圆后，加新鲜培养基，按1:3或按要求分瓶。此过程一般不需要离心，培养基中的血清会中止消化液的活性。有没其它消化方式，时间如何控制？消化液要吸出吗？常见问题：细胞没反应或消化过度怎么办？虞下熟咬革辑佛附焙阎湘匣讽嘶上超荔歉酉拾筏几葵邓蹄没夏援已恶簇铃细胞培养的常见问题及解决方案细胞培养的常见问题及解决方案问题五：悬浮细胞如何传代？细胞密度在2×106，也就是掌握在生长至