欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:57007268
大小:3.37 MB
页数:19页
时间:2020-07-26
《河北科技大学毕业答辩PPT标准模板课件.ppt》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、降解阿维菌素菌体的分离与初步鉴定学生:付常松学号:050401114指导教师:国洁2009年6月8日目录1引言2试验材料与方法3结果分析4结论5致谢本论文的研究内容主要包括以下几个方面:(1)阿维菌素降解菌的分离与纯化;(2)电镜检测;(3)抗生素敏感性试验;(4)最适生长条件的确定(阿维菌素浓度、酵母膏浓度、pH值、不同营养源)。1、引言2、试验材料与方法2.1试验材料2.2试验方法2.1试验材料(1)样品来源:河北威远生化制药厂阿维菌素好氧处理反应器中的活性污泥;(2)化学药品:酵母膏、抗生素、FeSO
2、4.7H2O、(NH4)2SO4、CaSO4、K2HPO4、MgSO4、乳糖、蔗糖、葡萄糖;(3)培养基:无机培养基;(4)实验仪器:电子天平(BP110S型)、生化培养箱(250B)、恒温摇床(HQ45Z)、震荡培养箱(3S-1E)、数字酸度计(PHS-2C)、可见分光光度计(VIS-72200)等。2.2试验方法(1)阿维菌素降解菌的驯化与分离:用稀释平板法分离细菌,经反复平板涂布,当提高阿维菌素浓度到250mg/L时选育出一株菌株。(2)菌体培养方法:好氧异养培养,培养基采用富集培养基,调节pH值为7
3、.2左右。采用摇瓶培养,摇床转速为120r/min,温度为30℃。(3)菌株的电镜检测:用扫描电镜观察菌株的形态,放大倍数为10000倍。(4)菌体生物量的测量:菌体生物量通过VIS-72200-可见分光光度计进行测定。其中,菌体生物量用660nm下测定的吸光度(OD660)表示。(5)菌株最佳培养条件的选择:菌株DAF在好氧培养条件下,主要考察了不同的营养基质、pH值、阿维菌素浓度对菌体生长的影响。(6)菌株的抗性实验:选择了五种常用的抗生素:土霉素、青霉素、链霉素、庆大霉素、盐酸霉素进行实验。3、结果分
4、析3.1阿维菌素降解菌的分离纯化与鉴定3.2阿维菌素降解菌DAF的生长特性研究3.1阿维菌素降解菌的分离纯化与鉴定(1)阿维菌素降解菌的驯化分离菌株DAF在固体培养基上呈圆形,菌落较小,边缘整齐,表面光滑,菌体呈淡黄色,极易挑起。(2)菌株DAF的形态观察及生理生化特性菌株DAF的细胞为杆状,无鞭毛,大小为1μm×0.5μm。菌株DAF为革兰氏阴性。3.2阿维菌素降解菌DAF的生长特性研究(1)菌株DAF的抗性实验结果:菌株DAF对青霉素敏感,无抗性,而对土霉素、链霉素、庆大霉素、盐酸霉素,具有抗性。(2)
5、营养源的利用:因此,微生物在酵母膏培养基中生长速率较快。(3)最佳生长pH值的确定:因此,pH值为7时,菌体生长最好。(4)菌株DAF在不同阿维菌素浓度条件下的生长情况:因此,阿维菌素度浓度为400mg/L时生长最好。(5)单一碳源:因此,菌株能够以阿维菌素为唯一碳源生长,从而间接判断菌株DAF对阿维菌素有降解作用。(6)不同酵母膏浓度对菌株生长的影响:因此,菌株DAF的最适酵母膏生长浓度为10g/L。4、结论菌株DAF在固体培养基上菌落较小、圆形、边缘整齐,表面光滑,菌体呈淡黄色,极易挑起,细胞为杆状,无
6、鞭毛,大小为1μm×0.5μm;(2)经染色试验知此菌株为革兰氏阴性菌;菌株DAF可以在好氧异养条件下生长,该菌株对青霉素敏感,不具有抗性,而对土霉素、链霉素、庆大霉素、盐酸霉素不敏感,具有抗性;(4)菌株DAF在30℃的条件下的最佳生长条件:酵母膏浓度为10g/L,pH值为7,阿维菌素浓度为400mg/L。由于时间紧,任务重,没有对菌株DAF进行16SrDNA序列分析测定,并且,可能还有些不了解的问题,这些问题,希望在以后的日子里,通过与老师和同学们的讨论中得到解决!!!请老师提出宝贵意见谢谢!
此文档下载收益归作者所有