血液生化自动分析仪.doc

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1、临床生物化学自动化分析技术第一节自动生化分析仪发展概况自动化仪器的定义:由机械化的仪器设备取代人的手工操作过程,具有信息反馈、自我监控、自我调节功能的仪器设备。1957年泰克尼康公司按Skeggs医师的设计方案,生产了第一台单通道连续流动式自动生化分析仪,最初只用于血葡萄糖、尿素氮的检测,结果以光密度值报告。1964年,Skeggs有报道了能够同时测定多个项目的自动生化分析仪。随后,泰克尼康公司生产出多通道自动分析仪系列,20世纪70年代中期又研制出SMAC,该仪器由计算机控制,分析速度可达150份标本/h,同时测定20个项目。第二节自动生化分析仪工作

2、原理一、自动生化分析仪的分类按反应装置的结构可分为:连续流动式离心式分立式“袋”式按自动化程度:全自动半自动按同时可测定的项目:但通道多通道按复杂程度及功能:小型中型大型按试剂反应方式:湿化学干化学按反应装置的结构分类法最常用1.连续流动式自动生化分析仪特点:流动室主要基于“气泡隔离连续分析”原理,将相同测定项目的样本与试剂混合后在同一管道中完成化学反应的测定过程。在检测过程中,样品盒样品之间需要空气精心隔离,或用空白试剂或者是缓冲液来隔离。前者叫空气分段式系统,后者为非分段式系统。工作过程:(1)通过比例泵将标本和时间按比例地吸到连续的管道系统中,在

3、管道系统呢样本和时间相结合完成混合、分离、保温反应、显色、比色的步骤。(2)将所测得的吸光度变化作计算,讲测试结果显示并打印输出。2.离心式自动生化分析仪特点:将样本和试剂房子特制的圆盘内,圆盘放在离心机上作为转头,在离心作用下完成混合、反应和测定。圆盘上有呈现放射状的三个一组的孔,起着里边一个孔加试剂,中间孔加样品,最外边孔的的上下表明用透明塑料制成,其做比色孔。转盘转动后,内孔中的试剂和中间孔的样品首先混合,最后进入外孔。单色光是按垂直方向通过比色孔进行比色测定,然后将所测得的吸光度进行计算,并显示与打印测试结果。3.分立式自动生化分析仪目前国内外

4、多采用的设计模式,具有结构简单和检测速度快的特点。特点:模仿是宏观操作,用加样探针讲样本加入各自的比色杯中,试剂探针按一定的时间要求自动的定量加入时间,经搅拌器混匀后,在一定的条件下反应。反应后将其抽入流的比色器中进行测定,或直接将特制的反应呗作为比色器进行比色测定。4.干化学自动生化分析仪采用干化学方法,将发生在液相反应物中的反应,专业到一个固相载体上,利用风检测系统进行检测的医疗新型仪器。二、自动生化分析仪的基本结构基本结构:样本系统反应系统清洗系统光路检测系统计算机控制系统1.样本系统样品盘或传送轨道加液器试剂室2.反应系统包括比色杯混合装置恒温

5、装置3.给排水及清洗系统4.光路检测系统包括光源灯分光装置信号检测装置5.计算机控制系统三、自动生化分析仪的基本原理1.可见、紫外分光光度法定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。公式为:A=εCL。其中吸光度A=-㏒(I/I0),I0为入射光强度,I为出射光强的,L为比色池厚度。如果浓度以mol/L为单位,液层厚度单位为cm,ε表示摩尔消光系数。其意义是1摩尔浓度的溶液在厚度为1cm是的吸光度。不同物质的摩尔消光系数不同,ε值越大,表示该物质对某波长的吸收能力越强。可见影响吸光度的主要因素有3种,及浓度、光程及波长。在光程及波长都不

6、变的情况下,吸光度就只与浓度有光。及物质在一定波长的吸光度与它的吸收介质的厚度和吸光物质的浓度呈正比。朗伯-比尔定律应用条件(1)入射光需单色光,因为物质对不同波长的光有不同的吸光系数。(2)一般适用于稀溶液的测定(3)介质应均匀,介质不均会引起偏离2.免疫比浊测定法比浊通过检测悬浮液或者胶乳溶液中物质对光的散射或透视强度。常用的免疫比浊法是采用某种蛋白特定的抗体作为试剂,能在复制的蛋白混合物中对该蛋白进行检测,又分为投射比浊和散射比浊。目前应用较多的为免疫透射比浊法。主要用于血清特种蛋白的检测,如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白等,以

7、及某些药物监测。一般比浊法德灵敏度不然可见、紫外分光光度法,但是免疫比浊法的灵敏度达到纳克水平,晚期能够满足临床检测需要。3.均相酶免疫分析法此法利用免疫反应的高度特异性和酶促反应的高度敏感性对抗原或抗体进行检测的一种分析方法。原理:当酶标志物与相应的抗原或抗体结合生成酶标抗原抗体复合物后,对标记酶产生调节作用,使酶的构象改变,酶活性机制或增强,酶催化的信号随之发生改变;酶标抗原抗体复合物与游离酶标抗原同处一相,不需分离步骤就可测定酶的活性,计算出被检抗原(半抗原)的含量。目前主要用于检测小分子半抗原,如某些激素、药物或带些产物,现在也逐渐用于大分子物

8、质,如血清IgG测定。4.酶促反应法由酶催化的反应称为酶促反应,酶促反应以酶作为试剂来进行分析

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