选修1 第五讲 DNA和蛋白质技术(教材专题5)课件.ppt

《选修1 第五讲 DNA和蛋白质技术(教材专题5)课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、选修一高考成功方案第1步高考成功方案第2步高考成功方案第3步第五讲一、DNA的粗提取和鉴定1．DNA的粗提取原理(1)根据DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。如图表示DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl溶液浓度变化而变化的曲线。(2)根据DNA，可用95%的冷酒精析出DNA。(3)根据DNA对的耐受性。不溶于酒精溶液酶、高温和洗涤剂2．DNA的提纯(1)方案一：利用DNA在不同的原理，通过控制NaCl溶液的浓度除去杂质。(2)方案二：直接在DNA滤液中加入，其中的能够分解蛋白质。(3)方案三：将DNA滤液放在的恒温水浴箱

2、中保温10～15min。木瓜蛋白酶嫩肉粉不同浓度的NaCl溶液中溶解度60～75℃3．DNA的鉴定(1)所用试剂：。(2)处理方法：将试剂与DNA溶液混合后5min。(3)现象：溶液颜色变。二苯胺试剂沸水加热蓝二、多聚酶链式反应扩增DNA片段(1)PCR原理：。DNA的热变性DNA缓慢，分离的DNA链又重新结合成双链DNA冷却(2)PCR的反应过程：①变性：当温度上升到以上时，双链DNA解聚为。②复性：温度下降到50℃左右时，两种通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。③延伸：温度上升到左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸(A，T，C，G)在的作用下，根据碱基互补配对原则合成

3、新的DNA链。90℃单链引物72℃DNA聚合酶④PCR反应的结果：DNA聚合酶只能特异地复制的DNA序列，使这段固定长度的序列呈扩增。处于两个引物之间指数三、血红蛋白的提取和分离实验1．凝胶色谱法的原理凝胶色谱法(也称分配色谱法)是根据将不同分子分离开来，即：的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度；而蛋白质不能进入凝胶内部，则移动速度，从而使相对分子质量不同的蛋白质得以分离。相对分子质量大小大分子较慢相对分子质量较小较快2．血红蛋白分离实验操作考点一DNA的粗提取与鉴定考情解读本部分在高考中所占的分值不大，近三年来的考查有下降的趋势。命题以简答题的形式为主，

4、考查点着重于DNA粗提取的原理及操作步骤，关于DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解与析出，DNA的鉴定，还将是今后高考的热点之一。[做一题][例1]回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。(1)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是()A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而易溶于有机溶剂D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应(2)由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成功，其原因最可能是()A

5、．操作方法不对B．人血含DNA太少C．NaCl溶液浓度太高D．加二苯胺太少(3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图：①正确的操作顺序是________________________。②上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是________________和________________。③上图A步骤中所用酒精必须是经过________才能使用，该步骤的目的是________。④为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加________试剂，沸水浴，如果出现________则该丝状物的主要成分为DNA。[解析](1)DNA在NaCl溶液中的溶解

6、规律如右图所示。DNA不溶于酒精等有机溶剂，在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺后呈现蓝色。(2)由于人属于哺乳动物，成熟的红细胞中不含细胞核、线粒体，所以几乎不含DNA，很难提取到DNA。(3)DNA粗提取的过程为：红细胞加蒸馏水，涨破后过滤→用2mol/LNaCl溶解→过滤除去不溶杂质→加蒸馏水，析出含DNA的黏稠物→过滤→黏稠物溶解在2mol/LNaCl中→过滤→溶于95%酒精进一步提纯，所以根据图示及以上分析，正确操作顺序为C→B→E→D→A。[答案](1)B(2)B(3)①C→B→E→D→A②加速血细胞的破裂　降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出③充分预冷　提取含

7、杂质较少(或较纯净)的DNA(4)二苯胺(或甲基绿)蓝色(蓝绿色)[链一串]1．DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较试剂浓度用途原理NaCl溶液2mol/L溶解DNADNA在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变，溶解度在2mol/L时最大、在0.14mol/L时最小0.14mol/L析出DNA2mol/L鉴定时的溶剂试剂浓度用途原理酒精95%(体积分数)除去杂质以提纯DNADNA不溶于酒精，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精二苯胺/鉴定剂DNA遇二苯胺(沸水浴)会变蓝色柠檬酸钠0.03g/mL抗凝剂除去血液中的钙离子，防止血液凝固2．